鼠艾滋病模型血浆病毒载量检测方法的建立及用于中药效果评价

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免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)自从美国疾病控制中心(CDC)首先报告此病以来,在短短几年内,其病患人数呈几何级数的增加,至2007年底全球估计3300万人感染艾滋病毒(humanimmunodeficiency virus,HIV),而国内2007年全国法定报告传染病疫情显示,与2006年相比,2007年全国艾滋病报告病例数上升幅度较大,达到45.04%。而到目前为止,仍然看不到治愈AIDS的希望。仍然在不断寻找抗AIDS有效药物。Friend leukemia virus作为一种逆转录病毒,感染小鼠后造成的免疫病理损害与AIDS相似,因此FLV感染小鼠一直被用作AIDS病理及抗AIDS药物筛选研究。但到目前为止还未见有直接检测FLV血浆病毒载量的方法。本研究建立了定量PCR检测FLV血浆病毒载量的方法并用于西药和中药的抗AIDS效果评价。在FLV的evelope蛋白保守区设计探针引物,体外合成FLVRNA标准品,用荧光定量PCR进行检测,该方法在逆转录反应体系中仅有4个FLV拷贝时即可检测到。用该方法评价了3个抗病毒药:齐多夫定(AZT)、阿德福韦、恩替卡韦。结果表明AZT无论用脾指数作为指标或者病毒载量作为指标都显示了显著的抑制FLV效果,而阿德福韦用脾指数作为观察指标无明显抑制FLV效果,但用病毒载量作为观察指标则显示了明显的抑制FLV效果;恩替卡韦则无论用脾指数还是病毒载量都未显示出抑制FLV作用。用该方法评价了一个中药复方对FLY感染小鼠模型的抑制FLV作用,结果显示中药复方高剂量组有明显抑制FLV作用。综合上述结果,本研究成功建立了FLV病毒载量检测方法,这种方法敏感而准确,并可用于中药抗AIDS研究。
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