凝血系统疾病死亡率高,危害大,愈来愈受到关注。目前我国每年至少约有500万此类患者需要治疗。蛇毒作为临床制剂与同类制剂相比,其效果良好,无严重的副作用,使用安全,在临床治疗上有很好的发展前景。国内关于蛇毒酶的利用多侧重于单一酶的研究,不能有效的开发利用蛇毒,造成了原料的浪费。因而,充分利用蛇毒,提高蛇毒制剂的产量,降低生产成本,使其更广泛的应用与临床治疗,成为了重要的研究课题。 本文中,五步蛇蛇毒通过Sephadex G-75分子筛层析后,纤溶酶活性组分与类凝血酶活性组分形成了初步分离,两活性组分分别处于两层析峰中。通过DEAE阴离子交换层析后,纤溶酶活性和类凝血酶活性组分得到了进一步的分离纯化。对层析后的酶活组分进行纯度检测,C18 HPLC图谱上均显示单一峰,SDS-PAGE图谱上均显示单一条带,纤溶酶分子量为24.1kD,类凝血酶分子量为14.4kD。 本文通过大量的文献研究,仔细研究对比纤溶酶和类凝血酶的各种分离纯化方法,简化实验步骤,分别分离纯化了两种酶。对整个分离纯化过程进行分析,发现:两种酶比活力较高,更重要的是两种酶的总活力回收率都有很大提高,其中纤溶酶的活力回收率达23.3%,类凝血酶活力回收率达34.5%。在蛇毒的分离纯化过程中,同时得到了两种酶,比较充分地利用了蛇毒,为进一步开发利用蛇毒探索了一条有效的途径。