山茱萸为山茱萸科(Cornaceae)植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉,主产于陕西、山西、河南等省,是我国传统的名贵滋补中药材。其药用历史已有两千余年,始载于《神农本草经》"治心下邪气寒热,温中逐寒湿痹,去三虫,久服轻身",其性酸、涩,微温,归肝、肾经,具有补益肝肾和涩精固脱之功效。山茱萸是一些经典中药名方的主药,如六味地黄丸、金匮肾气丸、左归丸等。研究表明山茱萸的化学成分主要为环烯醚萜类、鞣质类、黄酮类、三萜类和苯丙素类等。现代药理学研究表明山茱萸在抗炎、糖尿病的防治、心脑血管的保护、神经保护、抗肿瘤、抗氧化和抗衰老等方面均表现出较好的活性。虽然山茱萸含有多种药理活性,但其研究多集中于粗提物水平,而单体化合物少有报道。为了更好的阐明山茱萸的药效物质基础,对其化学成分进行系统的研究具有十分重要的意义。本论文对山茱萸水提物的化学成分进行了较系统地分离和结构鉴定,并且对分离到的单体化合物进行了初步的抗炎和神经保护作用的评价,为山茱萸的进一步开发利用提供了科学依据。根据环烯醚萜类化合物的最大紫外吸收在230 nm处特点,采用化学导向分离的思路,运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、SephadexLH-20柱色谱和制备高效液相色谱等方法从山茱萸中分离纯化得到80个化合物,根据UV、IR、MS、HRESIMS、1DNMR、2DNMR、CD、ECD等技术方法,鉴定了其中72个化合物的结构,包括41个环烯醚萜苷类化合物、3个单萜类化合物、5个黄酮类化合物、13个木脂素类化合物以及10个其它类型化合物(化合物名称见下表),它们分别为:cornuside A(1*),cornuside B(2*),cornuside C(3*),cornuside D(4*),cornuside E(5*),cornuside F(6*),cornuside G(7*),cornuside H(8*),cornuside I(9*),cornuside J(10*),cornuside K(11*),cornuside L(12*),cornuside M(13*),cornuside N(14*),cornuside O(15*),cornuside P(16*),cornuside Q(17*),cornusfuroside A(18*),cornusfuroside B(19*),cornusfuroside C(20*),cornusfuroside D(21*),6’-O-acetyl-7α-O-ethyl(22*),6-O-acetyl-7β-O-ethyl(23*),cornusglucoside A(24*),comusglucoside B(25*),comusglucoside C(26*),comusglucoside D(27*),cornusglucoside E(28*),cornusglucoside F(29*),comusglucoside G(30*),cornusglucoside H(31*),williamsoside D(32),loganin(33),8-epiloganin(34),7β-O-morroniside(35),7α-O-morroniside(36),7β-O-methyl morroniside(37),7α-O-methyl morroniside(38),7β-O-ethyl morroniside(39),7α-O-ethyl morroniside(40),sweroside(41),sarracenin(42),sachalinoide B(43),(4α)-3-(5,5-dimethyltetrahydrofuranyl)-1-buten-3-ol 3-O-β-D-glucopyranoside(44),apigenin(45),chrysoderol(46),luteolin(47),quercetin(48),dihydroapigenin(49)3,4,3’,4’-tetrahydroxy-δ-truxinate(50),(-)-isolariciresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside(51),(+)-isolariciresinol 3α-O-/β-D-glucopyranoside(52),(+)-pinoresinol(53),(+)-epipinoresinol(54),syringaresinol(55),(-)-episyringaresinol(56),(-)-medioresinol(57),(7S,8R)-urolignoside(58),glochidioboside(59),(7R,8S)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 9-O-β-D-glucopyranoside(60),(-)-secoisolariciresinol-9’-O-β-D-glucopyranoside(61),4-0-(6’-O-galloyl-β-D-glucopyranosyl)-cis-pcoumaric acid(62),5-(1 ’-hydroxyethyl ethylenediamine)-methyl nicotinate(63),cirsiumaldehyde(64),5-hydroxymethylfurfural(65),p-Hydroxybenzoic acid(66),ethyl gallate(67),syringate(68),p-coumaric acid(69),caffeic acid(70),caffeic acid methyl ester(71),p-methoxycinnamicacid(72)。其中化合物 1～31 为新化合物,化合物42～47,49～～64和72为首次从山茱萸属植物中分离得到。基于荧光素酶报告基因技术研究化合物1～15和32～41对STAT3通路的影响,评价其抗炎活性。实验结果显示化合物3,12,33,35,36对STAT3通路表现出明显的抑制活性且未表现出细胞毒性,构效关系研究表明:a.化合物的C-7"为β构型且与葡萄糖的C-3’脱水缩合形成醚键时,对STAT3通路表现出明显的抑制活性;b.化合物的C-7"为α构型且与葡萄糖的C-6’脱水缩合形成醚键时对STAT3通路表现出明显的抑制活性;c.马钱苷和7α,β-莫诺苷对STAT3通路表现出明显的抑制活性。采用脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)模型,采用ELISA试剂法检测化合物对细胞分泌的TNF-α、IL-6的抑制作用,评价化合物32～41的抗炎活性。实验结果表明化合物33对炎性因子TNF-α分泌的抑制作用超过50%,其余化合物未显示出抑制效果。此外,还对化合物1～15和32～41进行了 PC12细胞缺氧缺糖损伤保护作用的筛选。实验结果表明筛选的25个化合物中,化合物1和3与OGD/R相比,细胞存活率提高,说明化合物1和3对OGD/R损伤的PC12细胞物有一定的保护作用。