目的：肝细胞肝癌（HCC）是全球最为常见的致死性恶性肿瘤之一，导致HCC发病的主要危险因子是乙型肝炎病毒（Hepatitis B virous，HBV）、丙型肝炎病毒（Hepatitis C virous，HCV）的感染以及酗酒、黄曲霉素B1（AflatoxinB1）摄入。HBV是HCC最为主要的致病因子，全球有约有53%的HCC患者是与HBV感染相关的。由于我国的高HBV感染率，HCC在我国的发病率位居前列，是导致我国男性肿瘤患者死亡的第二大原因。欧美等西方国家近年来由于HCV感染率的上升，HCC的发病率亦呈上升趋势。HBV和HCV感染导致HCC的的机制并不相同，随着科学技术的发展，对HCC发病机制认识较前明显加深，推动HCC的诊断技术以及治疗技术取得很大进展。但由于缺乏有效的早期诊断和病程判断的标志物，大部分HCC患者在确诊时已失去手术机会，这些患者以及那些根治性手术后肿瘤复发、转移的患者因无有效的非手术治疗手段，预后极差。因此深入研究肝癌发病机制，以期获得一个可以有效进行早期诊断或预后判断的指标和有效的治疗靶点成为广大科研工作者的重要工作。Metadherin（MTDH）在多种恶性肿瘤中表达升高，参与多个重要的信号调控通路，如Ha-ras、NF-κB和Wnt/β-catenin，并参与了肿瘤细胞凋亡、增殖、迁移和转移的调控过程，但其致瘤机制并不完全明了，在HCC发病中的机制更是知之甚少。本实验我们观察了MTDH在HCC中的表达状况，并对其在HCC中发病中的机制作用进行了初步的研究。方法：分别采用qRT-PCR和Western blotting方法检测乙型肝炎和乙肝相关性HCC新鲜组织中MTDH mRNA和蛋白的表达水平，而后用免疫组织化学染色方法检测了上述组织的石蜡包埋切片中MTDH的表达水平。进一步统计分析了MTDH表达水平与乙肝相关性HCC临床参数之间的关系。细胞实验中采用Western blotting方法筛选MTDH高表达和低表达的HCC细胞系，而后分别以MTDH-shRNA或者pCMV-MTDH转染MTDH高表达和低表达HCC细胞系，对转染细胞通过MTT、流式细胞计数仪、western blotting、细胞划痕实验、transwell小室实验等实验方法检测增值、凋亡、迁移等相关指标和下游有关分子。最后，采用裸鼠荷瘤实验观察MTDH-shRNA抑制MTDH表达对成瘤的影响。结果：1、MTDH mRNA和蛋白在乙型肝炎和乙肝相关性HCC组织中均有不同程度的升高，但在正常肝脏组织中未见其表达。MTDH表达主要在细胞核，乙型肝炎组织切片中伴有肝硬化和不伴有肝硬化组之间MTDH表达无统计学差异(P=0.139)。MTDH表达水平与乙肝相关性HCC临床AJCC分期(P=0.020)，T分级(P=0.007)、N分级(P=0.044)、血管侵犯(P=0.006)和组织分化程度(P=0.020)显著相关。Spearman相关性分析MTDH表达和临床参数之间相关性显示MTDH表达与组织学分化程度(0.274; P=0.019)、AJCC分期(0.285; P=0.015)和T分级(0.244; P=0.048)显著相关。统计分析显示MTDH表达染色指数与乙肝相关性HCC患者总体生存时间之间存在显著负相关(Spearman correlation coefficient-0.385； P=0.001)。随后我们采用Kaplan-Meier分析和log-rank检验方法分析了MTDH对患者总体生存的影响。显示MTDH表达水平与乙肝相关性HCC患者生存时间显著相关(P=0.001)。MTDH高表达组患者平均生存时间为30个月(95%CI，23.4-36.8月)，5年累计生存率为19.4%，但MTDH低表达组患者平均生存时间为49个月(95%CI，42.5-52.8月)，5年累计生存率为65.1%。多变量Cox回归分析显示MTDH表达水平、AJCC分期、T分级和肿瘤分化程度是乙肝相关性HCC患者预后的独立预测因子。2、采用Western blotting方法检测了HepG2、MHCC97-H、Huh73个HCC细胞系中MTDH蛋白的表达水平，结果显示MTDH蛋白均为高表达，其表达水平高低顺序依次为HepG2<Huh7<MHCC97-H。随后我们成功建立了稳定表达MTDH-shRNA的MHCC97-H细胞。MTDH-shRNA有效抑制了MHCC97-H细胞中MTDH的表达，进而抑制HCC细胞的增殖、诱导HCC细胞凋亡增加，并使细胞周期停滞于G1/S期。进一步对MTDH相关分子的研究发现，MTDH调控着ERK1/2、FoxO3a、mdm-2、STAT3、caspase3的活性。与此相反，pCMV-MTDH可有效增加HepG2细胞中MTDH表达，并产生与上述相反之效应。3、体内实验显示MTDH-shRNA稳定转染的MHCC97-H细胞成瘤显著小于对照组，且瘤组织MTDH-mRNA表达显著低于对照组。说明MTDH-shRNA病毒转染颗粒可显著抑制裸鼠肝癌皮下移植瘤的生长以及瘤组织中MTDH基因的表达，以MTDH为靶点的RNAi方法对HCC的治疗有着良好的效果。结论：MTDH是一个新的具有一定早期诊断价值和评估HCC进展程度及预后的生物学标志物，对HCC患者的预后判断有预测意义。MTDH的异常表达在HCC的发生中起着重要作用，HBV感染可能是MTDH异常表达的始动因素之一。MTDH通过调控多种信号转导通路分子参与了HCC的发生和进展。RNAi技术可有效抑制MTDH表达，改善HCC细胞恶性的特征，并有良好的抑瘤效果，提示以MTDH为靶点的RNAi方法对HCC的治疗有着良好的效果。