海绵活性天然产物分离及结构确定

来源 :中国科学院研究生院(大连化学物理研究所) | 被引量 : 8次 | 上传用户:gjj19901005
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海绵是最原始的多细胞动物,属于海洋中营固生生活的一类群体动物。长期以来,海绵作为非经济类海洋生物,较少被人类研究。 自从二十世纪五十年代开始,逐渐从海绵中分离到大量的生物活性物质,从中发现了各类具有抗肿瘤,抗真菌,甚至抗HIV的活性天然产物。之后,海绵已作为一种重要的药源生物被人类所瞩目,海绵天然产物的研究也已成为海洋药物研发的一个重点领域。 本文在调查研究大连周边海域潮间带海绵资源及收集其它海域海绵材料的基础上,以黄海繁茂膜海绵及肾指海绵、南海多皱软海绵和锐利棘头海绵为对象,开展了从海绵中提取、分离天然产物的研究,以获得相关海域中海绵所含天然产物的重要信息,并期盼从我国海绵资源中发现具有特殊结构的新化合物或有药用价值的先导化合物。同时,结合海绵天然产物的特点,对天然产物分离、提取及结构鉴定技术的改进和发展作了一定的摸索。 以多皱软海绵为材料,对用于海绵天然产物筛选的方法进行了考察,如以定波长的紫外吸收值为评价萃取效率的参数;生物活性测定方法的改进与跟踪;重要天然产物的分子量的确定。在此基础上,从该海绵中获取一种多硫酸甾醇化合物22毛ζ-(2-羟基乙基)-23ζ-甲基-24ζ-乙基-胆甾-2β,3 α,6 α-硫酸酯,经鉴定为一种新结构化合物。经中国科学院昆明动物研究所测定,该化合物抑制HIV病毒复制的EC50为0.62μg/ml,初步研究表明其抗HIV-1活性的机制可能是阻断病毒与细胞的结合和融合。实验中,对该化合物的分子量进行多种方法的测定,虽未得到精确的分子量,但可获得分子量范围的信息。 对繁茂膜海绵中脂溶性天然产物作了较系统的研究。在优化分离提取工艺条件的基础上,共鉴定出57个化合物,其中13个甾类化合物,10个烃类化合物,3个羧酸类化合物,17个甲酯类化合物(其中包括5个自然界中罕见的奇数碳的脂肪酸酯),一个甘油三酯,以及10个以邻苯二甲酸二酯为主的环境污染物。海绵活性天然产物分离及结构确定 对该海绵分离、提取过程中的样品进行了活性检测跟踪。结果显示,57%的被检样品体现出抗金葡球菌活性;39%来自于丁醇层的样品具有抗细菌、真菌活性及高细胞毒性。在众多样品中发现一个结构还未最终确定的多轻基化合物,具有强抗肿瘤细胞活性,经测定对Burkitt,s淋巴瘤(Raji)细胞、人的肝癌细胞(Qgy7701)和人慢性髓原白血病(K562)的IC5o值分别为10.1林g/ml、9.76林g/ml和1 .90JJg/ml。 对肾指海绵与锐利棘海绵作了较初步的研究,从两种海绵中分别提取获得了8个与7个幽类化合物。活性跟踪表明:在从两种海绵中分离提取的各种样品里,均有一些样品具有较高抑菌活性,且抑菌活性多数表现为专一性。 本文同时以出类化合物的选择性提取、分离为目标,研究了海绵中幽类物质的选择性提取的相关方法及柱分离过程的流动相选择的条件,发现以溶剂强度为洗脱溶剂的梯度变化参数比极性参数的分离效率更好;同时还发现柱分离梯队洗脱中幽类物质最为集中的溶剂组成为环己烷:二氯甲烷为42:58(对繁茂膜海绵而言)、82:18(对肾指海绵而言),这也是其海绵全幽类化合物选择性提取效率最高的萃取溶剂。 在海绵天然产物研究过程中,存在着大量的化合物结构鉴定问题。在克服结构鉴定所面临的各种困难和完成众多化合物结构鉴定的基础上,本文对核磁谱图用于天然产物结构解析的有关问题,进行了较为深入的探讨,如:混合物组份的NMR谱图解析;混合物组成的’HNMR谱的定量;核磁差谱用于微量幽类化合物的结构信息获得等等。期望能对核磁谱图在天然产物结构解析中的实际应用提供有益的参考。
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