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研究背景角膜营养不良是一组与家族遗传有关的进行性双侧角膜混浊变性,按解剖位置可分为不同种类。Reis-Bücklers角膜营养不良(Reis-bucklers corneal dystrophy,RBCD)作为Bowman角膜营养不良的一种,为常染色体显性遗传,该病最初由Reis在1917年报道为环状角膜营养不良,1949年该家系被Bücklers重新观察后重新定义,其临床特征早期表现为点状混浊沉积在上皮细胞之间及Bowman层上下,一般不侵及基质层,晚期点状融合成地图状,沉积处病理染色嗜伊红呈红色,刚果呈红色,pas阴性。电镜下与典型颗粒状角膜营养不良相似表现为虫蛀状,短柱状,梯形的高密度颗粒,但免疫抗体反应证实混浊不是同一种物质。一般十岁前发病,症状明显,进程快视力在青年时期已经严重下降,常需要多次手术治疗,Thiel和Behnke于1967发现了一种与RBCD临床表现相似的角膜营养不良TBCD(Thiel-Behnke corneal dystrophy),表现为角膜经常性的糜烂,视力较快受到影响,常染色体遗传,蜂窝状混浊沉积在Bowman层上下,一直以来两者容易混淆,直到1995年küchle和利用基因测序的不同及临床表现,裂隙灯下角膜表现,病理组织学,电镜观察的差别及进行角膜移植术后预后结果的不同将两者正式分为两型。RBCD临床表现更早,裂隙灯下可见地图样混浊沉积在Bowman层,组织病理可见角膜上皮下Masson三色染色为亮红色呈束状的颗粒状混浊,电子显微镜下呈现小棒状的高密度颗粒。相比较之下,TBCD的临床表现及症状较RBCD表现轻,裂隙灯下可见蜂窝状的混浊沉积在Bowman层,组织病理可见角膜上皮下混浊不易被Masson三色染色,电子显微镜下呈现直径为9-15纳米的卷曲胶原纤维。进行角膜移植术后RBCD较TBCD更早复发。TGFBI基因又称为BIGH3基因,它由两个实验室于1994年分别发现在角膜上皮表达,同年TGFBI及三种角膜营养不良定位于染色体5p31。TGFBI含有17个外显子,编码长度为683个氨基酸组成的蛋白,目前发现的差不多有33个基因位点的突变在这个基因上,其中一半突变在编码蛋白质的124位点及555位点。国外相续报道将RBCD与R124L相关联,仅有几例报道非典型的RBCD与F540的缺失,H626P,G623D相关。而国内关于RBCD的报道极少。目的检测一中国汉族人Reis-Bücklers角膜营养不良(RBCD)家系TGFBI基因是否发生突变,分析中国人RBCD临床及遗传特点,进一步探讨基因型和表型之间的相互关系,探讨该病发生的分子遗传学机制。方法(1)收集一Reis-Bücklers角膜营养不良家系,采用聚合酶链反应及直接测序的方法对该家系中3例患者TGFBI基因进行突变检测,以家系中的3例健康者和100例无亲缘关系的正常人作对照;(2)通过PUBMED及CBM数据库,对1980年以来国外及国内报道的Reis-Bücklers角膜营养不良家系进行检索,对其临床及遗传特点进行分析总结。结果(1)家系中3例患者TGFBI基因的4号外显子第371位碱基鸟嘌呤G被胸腺嘧啶T替代,导致第124位氨基酸Arg变为Leu,而家系中3例正常人和家系外100例正常人未发现此突变;(2)所有报道的Reis-Bücklers角膜营养不良家系都符合常显遗传模式,大部分患者表现具有一定程度的相似性,但少数家系患者疾病表型存在差异;(3)国内的TGFBI基因型R124L和RBCD表型和国外报道一样同样存在明显的关联性。结论(1)TGFBI基因的错义突变c.371G>A (R124L)是导致该家系临床表型的主要原因;(2)RBCD患者临床表现很大程度相似,但仍有报道RBCD患者疾病存在差异;(3)TGFBI基因型和RBCD表型有明显的关联性。