上海粉虱种类及烟粉虱生物型分子鉴定

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:guoguo10
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粉虱属半翅目Hemiptera粉虱科Aleyrodidae,是一类体型微小的世界性害虫。粉虱种类的准确识别鉴定是检疫、防治及其他研究的基础,而粉虱形态可塑性及粉虱分类鉴定依据于第四龄幼虫的特殊性,降低了粉虱鉴定的时效性,给粉虱形态鉴定增加了难度。随着分子生物学技术的发展,分子标记方法用于物种鉴定及其他各领域的研究已逐步深入。本研究对上海地区粉虱种类进行调查采集,在形态鉴定的基础上利用线粒体细胞色素氧化酶I(COI)和细胞色b(Cytb)基因作为分予标记对其进行分子鉴定及系统发育研究,并进一步调查了烟粉虱生物型在上海地区的发生及分布情况。结果如下:本研究共记述上海地区粉虱科昆虫27种,分属于粉虱科粉虱亚科13个属。其中新记录种4种。在上海地区发生危害较重的有黑刺粉虱Aleurocanthus spiniferus (Quaintance)、烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)、柑橘粉虱Dialeurodes citri (Ashmead),桂花粉虱Dialeurodes ouchii (Takahashi)和新记录种栲粉虱Siphoninus phillyreae (Haliday)。利用COI基因通用引物测得粉虱科17种粉虱共24个单元型,大小为658bp的一段COI基因序列,序列分析表明:该片段在种内比较保守,遗传距离均小于0.003,而种间遗传距离在0.169-0.374之间,平均为0.274。将本文所测及Genbank所下载该基因同源序列构建NJ、MP及UPGMA3种系统发育树,结果显示,3种系统树均可很好的反映粉虱属下亲缘关系,同一物种不同单元型以很高的置信度优先聚为一支,其最初分支自展值均达100%,然后同属不同种聚为一支。其中NJ树所显示粉虱科昆虫亲缘关系与传统分类结果基本一致。结果表明,COI基因可用于粉虱科昆虫种一级水平的分子鉴定。通过对粉虱Cytb基因序列引物设计、目的片段的扩增及测序,共获得16种粉虱共22个单元型目的基因序列,序列长度为348bp。基于Kimura2-paramter模型计算的16种粉虱种间遗传距离在0.170-0.500之间,种间平均遗传距离为0.331,同属内不同种间遗传距离在0.170-0.266之间,而种内遗传距离均在0.010以下,远远小于种间遗传距离。基于该基因构建的NJ、MP及UPGMA3种系统发育树拓扑结构基本一致,同种不同单元型最初分支自展值达100%,然后同属不同种聚在一起。结果表明,Cytb基因适合粉虱种一级水平分子鉴定,而且该基因进化速率比COI基因快。基于COI基因对上海地区烟粉虱生物型进行分析,所测上海10个代表性地区中嘉定、青浦和徐汇区只检测到Q型,闵行区只检测到B型,其余各地区同时检测到B型和Q型两种生物型烟粉虱。所测上海地区共45个种群中,有31个种群为Q型,占所测种群的68.9%,14个种群为B型,占31.1%。而且,大棚采集种群多为Q型(占87.0%)。说明Q型烟粉虱己在上海多个地区分布,而且有可能进一步扩散并取代B型烟粉虱成为上海地区烟粉虱主要危害类型。
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