目的:环孢素A(CsA)已被广泛地应用于免疫性疾病的治疗,而环孢素亲合素(CyP)是细胞内CsA的受体,是发挥效应的关键途径。本研究首先应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)建立了CyP的检测方法;而后建立动物模型,在此基础上探讨阿霉素肾病肾组织CyP基因表达及与血总蛋白、白蛋白、血胆固醇、24小时尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐间的相互关系;同时在临床上观察CsA在不同病理类型肾病综合征间疗效、与CyP间的关系及临床意义。方法:采用不同的反应体系,寻找出RT-PCR测定CyP的最理想的检测方法;在阿霉素肾病动物模型中利用已建立RT-PCR检测技术测定阿霉素肾病肾组织CyP基因表达,以及与血总蛋白、白蛋白、血胆固醇、24小时尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐间的关系;在临床病例中收集明确诊断为肾病综合征的83例患者,逐渐减用糖皮质激素,给予口服CsA,剂量5mg/(kg·d),疗程6～24月,根据CsA血浓度调整CsA的剂量及监测CyP基因表达对CsA治疗的影响。结果:本研究结果表明①采用已建立RT-PCR检测技术,将标本与CyP、β-Actin二条引物分别进行RT-PCR后,于1.5%琼脂糖凝胶中电泳后发现CyP条带(408bp)与β-Actin条带(234bp)可清晰区分,无杂带出现。②采用已建立RT-PCR检测技术发现阿霉素肾病肾组织中CyP基因表达比对照组明显增高;与血总蛋白、白蛋白成负相关;与血胆固醇及24h尿蛋白成正相关;与肾功能无相关关系。③采用已建立RT-PCR检测技术,在临床上检测对不同病理类型的肾病综合征CyP基因表达,发现MsPGN组、FSGS组高于MCN组;对不同临床类型患者CyP基因表达,表明激素依赖、频繁复发、激素耐药三者无差异;在测定不同病期患者的CyP基因表达,发现肾病综合征急性期CyP的水平高于恢复期和对照组;临床资料进一步表明在应用CsA治疗不同病理类型肾病综合征,总缓解率达81.93%,在高浓度CsA时可产生肾脏损害,而血浓度维持在100～200ng/ml,CyP趋于相对稳定时才能促使肾病综合征的缓解。结论:①本研究建立RT-PCR测定CyP的检测技术,包括引物的设计、外周血及肾组织RNA的抽提和PCR产物的分析及定量,从分子水平叙述CyP的作用;该方法技术完善,方法新,灵敏度高,专一性与重复性好,稳定可靠,简便易行,快速等特点;同时克服了引物与模板结合效率,以及随后的样品处理所带来的误差,保证了本实验方法的科学性与准确性,为CyP的研究提供了新途径。②采用已建立RT-PCR检测技术发现阿霉素肾病肾组织中CyP基因表达比对照组明显增高;与血总蛋白、白蛋白成负相关;与血胆固醇及24h尿蛋白成正相关;与肾功能无相关关系。表明阿霉素肾病肾组织高水平的CyP基因表达是阿霉素肾病肾损害的轻重程度的重要指标之一。③CsA是替代糖皮质激素治疗免疫性疾病的较好方法之一,能有效而快速达到治疗免疫性疾病的目的。本研究在使用CsA治疗不同病理类型肾病综合征的患者中,严密监测CsA血药浓度、肾功能及肾小管的功能,同时采用已建立的RT-PCR检测技术进行CyP水平的监测,为合理地选用CsA治疗不同病理类型肾病综合征以及判断其疗效与预后提供可靠的理论依据。