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目的 AMP579是一种人工合成的腺苷拟似物，具有作用强、半衰期长等特征。有关腺苷对各种离子通道的作用已有相关报道，但未见对大鼠心室肌离子通道的研究报道，AMP579对主要离子通道和转运体的研究则在任何动物及心肌组织均未见报道。本课题旨在较全面地研究AMP579对心肌离子通道的作用，并与同等剂量腺苷的作用相比较，探讨它们对心肌离子通道作用的差异，从更深层次上分析AMP579与腺苷对心肌的药理作用和临床效应差别的机制，估价AMP579作为减轻缺血再灌注损伤和抗心律失常药物的应用前景。材料和方法 AMP579为美国Emory大学医学院心胸外科研究室馈赠。研究对象为成年大鼠和豚鼠经酶分散的心室肌细胞。采用膜片钳全细胞记录模式记录离子通道电流。结果 1.对大鼠心室肌ICa-L的作用。腺苷在 10nmol/L至50μmol/L浓度范围内对ICa-L均无显著作用，但如果预先灌流10nmol/L的异丙肾，腺苷在实验浓度范围内对异丙肾增强的ICa-L均有抑制作用（表1、2，图1、2），IC50为13.06μmol/L。AMP579 10nmol/L对ICa-L有浓度依赖性抑制，IC50为1.77μmol/L,对异丙肾增强的ICa-L亦有显著抑制作用（表3，图3、4）。AMP579对异丙肾增强ICa-L的抑制作用高于腺苷（在10μmol/L浓度抑制率分别为-11.1%与-5.2%）。在预先灌流腺苷A1受体阻滞剂PD116948之后，AMP579仍对ICa-L有显著抑制作用（表4），而在AMP579 10μmol/L抑制ICa-L基础上，灌流腺苷A1受体阻滞剂PD116948 30μmol/L对AMP579的抑制作用无影响,说明AMP579对ICa-L的直接抑制与腺苷A1受体无关（表5）。预先给予PKC阻滞剂GF109203X 0.4μmol/L,AMP579失去了对ICa-L的抑制作用（表6）。在AMP579 10μmol/L对ICa-L抑制的基础上灌流PKC阻滞剂GF109203X 0.4μmol/L,可逆转AMP579对ICa-L的抑制作用（表7，图5）,说明AMP579对ICa-L的抑制与PKC有关。2. 对大鼠心室肌Na+/Ca2+交换电流的作用。腺苷在10μmol/L至50μmol/L浓度范围内对Na+/Ca2+交换电流无显著作用（表18，图16），AMP579<WP=6>对Na+/Ca2+交换的外向电流在1μmol/L以上呈浓度依赖性增强,在1μmol/L以上的内向电流亦呈浓度依赖性增强，P<0.05（表18,图17）。在APM579 10μmol/L的基础上，加入腺苷A1受体阻滞剂PD116948 30μmol/L，对Na+/Ca2+交换外向电流与内向电流均无显著影响（表19、20，图18），在AMP579 10μmol/L的基础上， 加入腺苷A2受体阻滞剂DMPX 10μmol/L，对Na+/Ca2+交换外向电流与内向电流亦无明显作用（表21、22，图19）。在AMP579 10μmol/L的基础上，加入PKA阻滞剂RT5720 0.2μmol/L或加入PKC阻滞剂GF109203X 0.4μmol/L,对Na+/Ca2+交换的外向与内向电流亦无明显著影响 （表23-26，图20、21）。提示AMP579对Na+/Ca2+交换电流的激动作用可能是它对Na+/Ca2+交换体的直接作用。3． 对大鼠心室肌Ito电流的作用，腺苷和AMP579对大鼠Ito电流均有激动作用（表8）。腺苷和AMP579的EC50分别为2.33μmol/L和8.32μmol/L（P<0.05），腺苷的作用较强。两者激动Ito的机制也相同，均可被腺苷A1受体阻断剂PD116948阻断，（表9、10、13、14，图6、8）表明这一作用是经A1受体介导的。4． 对大鼠心室肌电压门控钠电流的作用。腺苷和AMP579对大鼠心室肌电压门控钠通道均有抑制作用（表16，图11、12）。作用的强度相似，腺苷和AMP579对钠电流的IC50分别为6.23μmol/L和9.46 μmol/L。5． 对豚鼠心室肌IK电流的作用，腺苷和AMP579对豚鼠心室肌IK电流及其尾流均有显著抑制作用（表17，图13、14），IC50分别为1.21μmol/L和2.31μmol/L。（P<0.05），表明腺苷的作用较强。6． 对大鼠心室肌IK1电流的作用，腺苷和AMP579对超极化电压阶跃激活的IK1内向电流均有显著抑制作用（表15，图9、10）。AMP579的作用较强，AMP579与腺苷对IK1的IC50分别为4.15μmol/L和20.7 μmol/L,（P<0.01）。讨论和结论 尚未见到有关腺苷对大鼠心室肌离子通道作用的研究报道。本研究全面观测了腺苷对大鼠心室肌各种离子通道的效应，其结果与前人在其它动物报道的腺苷对ICa-L、Ito和钠钙交换电流的作用相一致。经检索，未发现有关AMP579对心肌离子通道影响的研究报道。我们对AMP529研究的结论可归纳以下几点： <WP=7>1． AMP579对心室肌L型钙电流比腺苷有较强的抑制作用，其抑制异丙肾增强的钙电流作用大于腺苷的抑制作用。10 μmol/L 的AMP579与10 μmol/L的腺苷对ICa-L的抑制率分别为-11.1%与-5.2%，AMP579对未经干预的钙电流亦有抑制作用。这可以解释其对抑制中性粒细胞介导的炎性反应，抑制心肌收缩力，扩张冠脉血管，减轻缺血再灌注损伤等方面的较强作用。2． AMP579可以显著增强Na+/Ca2+交换电流，这一作用可能是其直接的药理作用。由于在缺血和再灌注早期，心肌内Na+浓度较高，静息膜电位负值减少，此时的Na+/Ca2+交换电流以反向模式（Ca2+内入，Na+外排）为主，因此，AMP579的这一作用对防止心肌缺血再灌注损伤是不利的。这与它对L型钙电流较强抑制所带来的有利效应是相互对消的。关于AMP579对缺血-再灌注的保护作用及减少梗死面积的效应仍需进一步的实验研究和临床观察。3． AMP579对心肌细胞INa电流的抑制作用?