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目的本研究通过对非运动行为学方法的构建,探讨经MPTP诱导的慢性帕金森病食蟹猴模型的非运动症状,进而评价普拉克索对该模型的治疗效果。方法本研究采用非人灵长类动物(食蟹猴)10只(年龄15±1.5岁),其中5只为慢性帕金森模型(颈内动脉注射MPTP辅以静脉小剂量注射建立PD模型)、5只为正常对照。建立评价非人灵长类动物非运动的行为学方法,包括延迟样本匹配实验(the delayed matching-to-sample task,DMTS)、全身运动活动总量(Physical Activity Monitoring,PAM)、渐进比率测试(Progressive Ratio task,PR)、人类入侵者测试(Human Intruder Test,HIT)、新颖水果测试(Novel Fruit Test,NFT)、潜在捕食者实验(Predator Confrontation Test,PCT)、哄骗取食测试(Apathy Feeding Test,AFT),并比较该模型认知记忆、睡眠、动机、焦虑抑郁等非运动行为学指标的变化。同时采用行为学方法评价普拉克索(Pramipexole,PPX)治疗慢性帕金森病食蟹猴的疗效。结果1.在学习能力的结果中显示,PD组动物出现学习能力下降(Control组:100%,PD 组:60%);2.在认知行为学DMTS测试中,经5s、10s、15s及30s延时后,PD组正确率均明显低于 Control 组(5s:u=4.667,P=0.031;10s:u=4.667,P=0.031;15s:u=5.600,P=0.018;30s:u=4.755,P=0.029),PD 组动物存在明显的认知记忆降低;普拉克索对PD组动物进行治疗,PD+PPX组正确率无明显改变(5s:u=0.292,P=0.589;10s:u=1.212,P=0.271;15s:u=0.549,P=0.459;30s:u=1.167,P=0.280),结果显示认知记忆无明显改善;3.在夜间12h的全身运动活动总量PAM芯片检测中,经MPTP诱导的PD 夜间活动量高于 Control 组(Control 组:2000.55±1364.78;PD 组:2752.40±1906.57,t=-1.466,P=0.151),普拉克索对PD组动物进行药物干预,动物睡眠状况有所缓解(PD+PPX 组:2042.56±1060.97,t=0.847,P=0.403);4.在动机PR测试中,PD动物的动机显著降低(Control组:60.77±13.89;PD组:46.88±11.43,t=3.944,P=0.000),经普拉克索对PD组动物进行药物干预,动机显著增加(PD+PPX 组:58.21±13.13,t=-3.189,P=0.003);5.焦虑综合测试(HIT、NFT、PCT)(1)在HIT中,PD组运动及站立行为均高于正常组,出现了异常的抓挠、磨牙、冻结、摇晃笼具等行为(P>0.05),而笼后时长在直视期与背对期明显低于 Control 组(侧面期:120(51.77),51.93(61.01);直视期:111.27(38.94),0.00(64.70));PD组表现为行为高反应性,包括冻结、磨牙、抓挠、哈欠,但统计学比较无显著性(P>0.05),提示存在不同程度的焦虑行为,表明PD组动物存在焦虑情绪。经普拉克索给药干预,表现为更高的活动性,异常的抓挠、磨牙、冻结、摇晃笼具等行为均存在不同程度的减少(P>0.05),且笼后时长在侧面期、冻结时长在基线期及侧面期均减少(P<0.05);(2)在 NFT 中,Control 组、PD 组拿取率分别为100%、80%,Control组与PD组面对熟悉和新颖水果的观察及拿取时长无明显差异性(P>0.05),经普拉克索对PD组动物进行治疗均无明显变化(P>0.05)。(3)在PCT中,Control组、PD组的拿取率分别为80%、40%;退缩率分别为20%、60%;但观察食物时长无明显差异性(Control组:1.18±0.82;PD组:1.13 ± 1.08,t=0.079,P=0.939),经普拉克索对PD组动物进行治疗均无明显变化(PD+PPX 组:0.85±1.16,t=0.396,P=0.702);6.在抑郁AFT测试中,PD组右侧障碍,左侧观察食物时长均高于Control 组(观察时长:Control 组 0.53(0.17),PD 组 0.85(0.53),u=3796.000,P=0.000;拿取时长:Control 组 0.53(0.13),PD 组 0.83(0.24),u=4787.000,P=0.000),普拉克索对PD组动物进行药物干预后,左侧观察及拿取食物时长明显降低(观察时长:PD 组 0.85(0.53),PD+PPX 组 0.45(0.31),u=599.000,P=0.000;拿取时长:PD 组 0.83(0.24),PD+PPX 组 0.53(0.14),u=162.000,P=0.000)。结论本研究采用正强化和负强化训练相结合的方式,创新的建立了多种行为学训练方法并进行量化,多层次多角度的综合评估慢性帕金森病非人灵长类动物模型的非运动行为。研究结果表明经MPTP诱导的慢性帕金森病食蟹猴与人类帕金森病类似,存在认知能力下降、睡眠障碍、‘冷漠或动机丧失及不同程度的焦虑抑郁症状等非运动行为障碍。普拉克索作为一种非麦角类多巴胺受体激动剂,可缓解慢性帕金森病食蟹猴的非运动行为障碍,包括睡眠、冷漠或动机及不同程度的焦虑抑郁症状。总之,本研究对经MPTP诱导的食蟹猴模型的非运动行为学的方法与评价探讨,将为非人灵长类动物的行为学测定提供方法依据,并为之后的疾病机理等生物医药研究奠定基础。同时,从非运动行为的角度进一步证实了经MPTP诱导帕金森病食蟹猴模型的可靠性,为临床前研究提供了新的载体。