强骨宝方对糖尿病性骨质疏松大鼠骨胶原代谢影响的实验研究

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目的:研究糖尿病性骨质疏松(DOP)模型大鼠骨胶原代谢状况及强骨宝方的影响,旨在从骨胶原代谢的角度探讨DOP的发病机制及强骨宝方的防治机理。 方法:将47只SD大鼠适应性喂养1周后,按性别随机抽取8只(雌雄各半)作为正常组,余下39只进行造模。在禁食不禁水12小时后,对拟造模大鼠以生理盐水配制成2.5%新鲜Alloxan溶液,按120mg/kg体重隔日两次腹腔注射进行造模;所有造模鼠从造模完成后24小时起后肢大腿皮下注射长效胰岛素0.4U/100g体重,隔天1次,作为基础胰岛素以维持生命。造模5天后尾静脉采血测BG,7天、9天后各重复1次,以3次血糖值均大于16.7mmol/L者为DM造模成功鼠。DM成模7周后以带动物软件的PRODIGY全自动双能X线骨密度测量仪测正常组及模型组大鼠全身BMD。取BMD小于同批正常鼠2.5个标准差的作为DOP模型鼠。按性别随机抽取30只造模成功DOP鼠分为模型组、阳性对照(消渴丸和阿法迪三)组、强骨宝组,每组各10只,雌雄各半。正常对照组、模型组灌服蒸馏水;阳性对照组灌服消渴丸+阿法迪三混悬液;强骨宝组灌服强骨宝方混悬液,均10ml/kg·体重,1次/d。灌服药物给药量按大鼠体表面积系数由正常人日用量换算而得等效剂量比值,消渴丸0.75g/kg·d、阿法迪三0.05μg/kg·d、强骨宝药液每1ml含生药4g。第14周进行取标本,检测血液细胞因子(IL-6、TNF-α、IGF-1)、骨胶原代谢生化(PICP、ICTP)、胫骨每克骨骨胶原含量、骨胶原糖基化终末产物等指标,并对股骨骨组织进行胶原免疫组化染色观察。 结果:14周后,与正常对照组比较,模型组骨胶原AGEs值非常显著升高(p<0.01),血清IL-6、TNF-α、ICTP显著升高(p<0.05);而血清IGF-1、PICP及胫骨每克骨骨胶原含量均非常显著降低(p<0.01);骨胶原组织染色观察显示胶原细小、稀疏、碎裂、排列不整齐,图像定量分析也显示骨胶原含量非常显著减少(p<0.01),且与模型组比
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