甘肃天祝高寒草甸两个孢囊线虫新种鉴定及生物学特性研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kevil2009
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孢囊线虫(Cyst-forming nematode)是一类适应能力强、寄主种类多、分布范围广的植物寄生线虫,可造成重要作物的经济损失。目前,高寒草甸孢囊线虫的相关研究十分匮乏。因此,本研究调查了甘肃高寒草甸牧草孢囊线虫的发生与分布,描述了两种寄生在牧草上的孢囊线虫新种,并对其进行生物学特性、豆科作物寄生性测定以及潜在分布进行研究,研究结果如下:1.2018-2020年间,采用随机抽样法对甘肃天祝高寒草甸牧草孢囊线虫进行调查,在5个乡(镇)34(村),共采集牧草及其根际土壤样品236份,寄主包括12科21种牧草。其中77份样品发现孢囊线虫,检出率为32.63%,抓喜秀龙乡的孢囊线虫检出率最高,为57.7%,该乡永丰村平均孢囊密度最大,每100g土中含孢囊线虫30.25个,发现微孔草(Microula sikkimensis)和珠芽蓼(Polygonum viviparum)根系孢囊线虫基数较大,最高分别达到每100g土61和31个孢囊。2.微孔草孢囊线虫新种寄生在微孔草根系,形态学观察发现该线虫孢囊柠檬形,颈长,阴门钝圆,双半膜孔,无下桥和泡状突。二龄幼虫线形,口针发达,基部球圆且向上略有凹陷,侧线四条,尾圆锥形且约为透明尾长的2倍,该种归分到孢囊属(Heterodera)豌豆组(Goettingiana group)。相比于豌豆组内7个有效种而言,该线虫孢囊阴门膜孔和阴门裂长均小于7个有效种,但二龄幼虫体长与中食道球与体前端距离均大于7个有效种。基于ITS-r DNA、28S-r DNA和mt DNA COI序列的系统发育揭示了该线虫与其他孢囊属豌豆组线虫形成了一个单独的分支,更加支持该线虫的独特性。因此,本研究将其归分为孢囊属线虫新种,命名为微孔草孢囊线虫(H.microulae sp.n.)。3.天祝棘皮孢囊线虫新种寄生在珠芽蓼根系,孢囊柠檬形或圆形,颈尾突出,环膜孔,外阴齿发达,肛门明显,但无下桥和泡状突。二龄幼虫蠕虫状,口针强壮,基部球向上略有凹陷,侧线4条,尾部圆锥形,透明尾轮廓为V状和U状,侧尾腺孔明显。卵表皮平滑无刻点。隶属棘皮孢囊属(Cactodera)。该线虫与C.thornei形态最为相似,但唯一的区别是前者卵壳表面光滑,后者有刻点。分子生物学特征经ITS-r DNA、28S-r DNA,发现该孢囊线虫与近缘种r DNA序列差异较大,且系统发育树揭示了该线虫形成了一个单独的分支,更加支持该线虫的独特性。基于此,将其定为新种,命名为天祝棘皮孢囊线虫(C.tianzhuensis sp.n.)。4.微孔草孢囊线虫和天祝棘皮孢囊线虫生物学特性研究发现,微孔草孢囊线虫的最适孵化温度为15℃,天祝棘皮孢囊线虫为20℃。土壤浸液和稀释20倍根汁均能促进两者孵化,但5倍根汁抑制二者的孵化。微孔草孢囊线虫二龄幼虫在15℃存活力和活性较强,天祝棘皮孢囊线虫则在18℃下较强。在4℃时可以更好地保存二者的二龄幼虫,但幼虫活性较弱。在15℃下,微孔草孢囊线虫完成一个生活周期需要27d。5.微孔草孢囊线虫寄主范围测定发现,微孔草孢囊线虫二龄幼虫均可侵入豌豆、豇豆、菜豆、绿豆和蚕豆等豆科作物,经染色发现侵染后均有较强的褐化反应,其中在蚕豆上繁殖能力最强,在豇豆最弱。60d后,在蚕豆中检出孢囊线虫,形态测量值除孢囊长、宽外,其他测量值均小于原始群体。Max Ent分析发现,微孔草孢囊线虫的潜在分布区为甘肃中部、青海东部和西藏中部地区,当最湿月降水量约为98mm时,存在概率最大。其他重要环境因子包括最湿季降雨量约为240mm,最暖季降水量约为200mm以及最湿季平均气温约为11.5℃,最为适宜。
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