泥鳅的血液学及湖北省泥鳅群体的遗传多样性研究

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泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)是我国常见的小型淡水鱼类,其肉质细嫩、味道鲜美,营养丰富,且具有较高的药用价值,被誉为“水中人参”。近年来,随着人们消费观念的转变,泥鳅的市场需求量日益增加。但由于多年的过度捕捞,加上天然水域生态环境日益恶化,我国野生泥鳅的产量正面临枯竭。自上世纪90年代开始,泥鳅的繁育和养殖业在我国逐步得到发展,泥鳅目前已经成为我国重要的水产经济鱼类。血液是动物体内循环系统的重要组成部分,具有物质运输、生理调节及生理防御等重要功能。因此,鱼类的血液指标被广泛地用来评价鱼类的健康状况、营养状况以及对环境的适应状况,是良好的生理、病理和毒理学指标。本研究通过对不同倍性以及不同生活环境泥鳅的血液学进行比较研究,以探讨倍性差异和生活环境差异对泥鳅血液指标的影响。此外还分析了湖北省内二倍体泥鳅的遗传多样性,以期为泥鳅的种质资源保护提供数据基础。主要研究结果如下:1.二倍体、三倍体和四倍体泥鳅的血液学比较将天然四倍体泥鳅♀与二倍体泥鳅(?)杂交产生三倍体泥鳅,将天然二倍体和四倍体泥鳅分别自交产生二倍体和四倍体泥鳅,将此二、三、四倍体泥鳅在完全相同的环境下养殖7个月后进行血液指标比较分析。结果表明,三倍体和四倍体泥鳅的血细胞明显比二倍体大;四、三、二倍体泥鳅的红细胞和白细胞(嗜中性粒细胞和血小板)间的大小比值均为4:3:2。红细胞数目随倍性的升高而降低,总血红蛋白量、细胞体积、平均血红蛋白量和平均血红蛋白含量随倍性升高而升高,不同倍性泥鳅间的血容未见显著性差异。红细胞渗透脆性随倍性升高而降低,表明多倍体泥鳅的红细胞比二倍体有更强的抗渗透压能力。从以上结果可以推测,多倍体泥鳅的血液较二倍体有较强的抗逆性。2.野生和养殖泥鳅的血液生理生化指标比较在泥鳅的快速生长季节(5-8月)分析了野生和养殖泥鳅的血液生理生化指标差异,以探讨营养状况和生境差异对泥鳅生理生化指标的影响。结果表明,养殖和野生群体的泥鳅在血红蛋白浓度、胆固醇含量、总蛋白、肌氨酸酐和尿酸等方面存在显著性差异(n=56,df=54,P<0.05)。养殖泥鳅的红细胞数目、葡萄糖、甘油三酸酯和尿素氮含量明显高于野生群体,而白细胞数目明显低于野生群体(n=56,df=54,P<0.01)。这些差异表明,生活环境和营养状况会影响鱼类的能量代谢和健康状况。3.湖北省内泥鳅群体的遗传结构分析对采自长江中下游水系的12个群体泥鳅的13个具有多态性的微卫星位点进行了遗传分析。结果表明,每个位点的等位基因数在2到8个之间,平均每个位点有4.6个等位基因。观测杂合度在0.38-0.95之间。13个位点的平均观测杂合度和期望杂合度分别为0.57和0.56。约50%的微卫星位点显著偏离(P<0.01)哈代-温伯格平衡,表现出明显的杂合缺失,其原因可能是由于过度捕捞和迁移不平衡造成的。分子方差分析结果(AMOVA)显示,大多数的变异存在于个体间(90.50%),而群体间变异则较少(9.03%)。固定系数(FST)和标准遗传距离结果表明,采集于分离栖息地的泥鳅的遗传距离相对于长江水系的群体遗传差异显著、遗传距离较远。UPGMA聚类分析将所有的泥鳅群体分为两大类,有趣的是,ZIG和XGN群体在遗传学上的聚类位置与其地理聚类位置刚好相反。上述结果表明,这12个群体的泥鳅主要形成两大地理种群,形成这样两个群体的原因,一方面可能是由于调查采样的局限,另一方面可能是泥鳅活动能力低下以及长江近年来泛滥的减少。
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