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光致电化学分析方法是利用光能激发物质产生光电流,通过直接或间接检测光电流的强弱实现检测目的分析方法。光致电化学分析方法的激发与检测是分步进行的,相对于光学方法而言,具有设备简单、成本低廉、易于微型化和集成化的优点;相对于电化学方法而言,由于光电流产生的原理类似于电催化原理,灵敏度较一般电化学方法要高,可与电化学发光分析法相媲美。光致电化学分析方法一般要借助于光敏电极,它是指利用具有光电活性的材料制备的光电极。本文将具有光电活性的硫堇电聚合在ITO电极的表面,构建了光电化学界面。该界面同时具有光敏和电子受体的功能,能与电子供体H2O2发生光电化学反应。由于H2O2是氧气还原和生物体内许多酶催化反应的中间产物,通过检测由此产生的光电流可实现对酶活性及底物的检测。本文通过聚硫堇光敏感界面的构建,做了以下四个方面的研究:1.将具有光电活性的硫堇电聚合在ITO电极的表面,使其与电子供体H2O2发生光致电化学反应,通过检测光电流实现对H2O2的检测。探讨了聚硫堇/过氧化氢光电化学敏感界面的响应机理,讨论了偏置电压、电解质溶液pH对光电化学反应和测定H2O2的影响。2.在测定H2O2基础上,利用光电界面与葡萄糖氧化酶催化葡萄糖产生的H2O2之间光致电化学反应产生的光电流实现对葡萄糖氧化酶催化活性的检测。探讨了光致电化学响应原理及偏置电压、电解质溶液pH和底物浓度对测定葡萄糖氧化酶催化活性的影响。通过测定商品葡萄糖氧化酶的催化活性,验证了方法的可行性。3.制备了一种新型光致电化学葡萄糖传感器。应用壳聚糖将葡萄糖氧化酶固定在聚硫堇光电极表面。优化的实验条件为固定化酶量为35μL葡萄糖氧化酶溶液（49.2mg·ml-1、122U·mg-1）、偏置电压为0.50V（vs.Ag/AgCl）、壳聚糖浓度为0.3%、pH5.5。该传感器的光电流与浓度范围为5.00～400×10-5mol·L-1的葡萄糖呈良好的线性关系,检测限为0.20 mmol·L-1。传感器具有良好的重现性,使用一周后,仍能保持其初始活性的90%以上。4.制备了一种新型光致电化学胆碱传感器。该传感器利用壳聚糖作为固定基质,戊二醛作为交联剂。优化的实验条件为固定化酶量为5μL胆碱氧化酶溶液（1.50mg·mL-1、12U·mg-1）、偏置电压为 0.50V（ks.Ag/AgCl）、壳聚糖浓度为 1%、pH6.5。该传感器的光电流与浓度范围为5.00-250×10-5mol·L-1的胆碱呈良好的线性关系。传感器具有良好的选择性和重现性,65.7 nA·mmol-1·L-1的灵敏度和30.0μmol·L-1的检测下限。