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目的：对所培养的毛囊干细胞进行鉴定,并比较3种不同培养基对于大鼠毛囊干细胞增殖情况的影响。方法：取洁净SD大鼠乳鼠触须部组织,联合使用显微分离技术+中性蛋白酶Ⅱ消化+胰蛋白酶和乙二胺四乙酸混合液消化法获得细胞悬液,使用Ⅳ型胶原差速贴壁法筛选毛囊干细胞。通过倒置显微镜下观察细胞形态特征,吉姆萨染色、流式细胞仪CD34、β1-整合素(CD29)及CK15检测,成骨诱导后茜素红染色、成脂诱导后油红O检测联合用于鉴定所获得细胞为具有多向分化能力的毛囊干细胞。之后取显微分离法+二部酶消化法所得细胞悬液计数后按细胞量平均分为3组,分别使用DMEM/F12培养+体积分数10%胎牛血清、角质细胞无血清培养基以及角质细胞无血清培养基+体积分数10%胎牛血清分三组进行培养,从细胞活率、生长曲线、流式细胞仪鉴定标记物几个方面对三组培养后的干细胞进行比较,从而间接判断三种不同培养基对于毛囊干细胞增殖所产生的影响。结果：大鼠毛囊干细胞生长状况良好,CK15、CD34、β1-整合素(CD29)表达阳性,成骨诱导后茜素红染色阳性、成脂诱导后油红O阳性,此3组间细胞活率差异无显著性意义(P>0.05)。生长曲线显示：生长速度角质细胞无血清培养基+体积分数10%胎牛血清>DMEM/F12培养+体积分数10%胎牛血清>角质细胞无血清培养基(P<0.05)。DMEM/F12+10%胎牛血清组中CK15、CD34、β1-整合素(CD29)表达均低于其他2组(P<0.05),角质细胞无血清培养基组CD34的表达高于角质细胞无血清培养基+10%胎牛血清组(P<0.05),β1-整合素(CD29)及CK15则无统计学差异。结论：使用上述方法培养的大鼠毛囊干细胞生长状况良好,具有毛囊干细胞表面标志物,并具有多向分化能力。角质细胞无血清培养基较DMEM/F12+10%胎牛血清能培养出纯度更高的毛囊干细胞,且在此培养基基础上加入胎牛血清,能够促进细胞的增殖。