MiR-181b靶作用于Notch1调控巨噬细胞的极性影响动脉粥样硬化斑块不稳定性

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sima1969
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在伴有不稳定动脉粥样硬化斑块的急性脑卒中患者中,我们检测到,其血浆中miR-181b水平明显较正常人组下降。动物实验部分,我们将8周龄ApoE-/-小鼠随机分为三组(N=10):正常饮食+尾静脉注射生理盐水组(Ctrl),高脂饮食+尾静脉注射miRNA agomir-control组(AG-NC),高脂饮食+尾静脉注射miR-181b agomiir组(181b-AG)。于20 W时,利用PCR检测不同组的小鼠,我们发现AG-NC组血浆中miR-181b水平明显低于Ctrl组,181b-AG组小鼠miR-181b水平则高于Ctrl组。进一步分离三组20 W小鼠的主动脉,对其进行油红O染色,发现AG-NC组动脉粥样硬化的面积明显高于Ctrl组,181-AG组则明显低于AG-NC组。分别切去三组小鼠主动脉瓣环处斑块,进行成分染色,即HE染色斑块大体观,油红O染色脂质核心,MASSON染色胶原纤维,α-SMA染色平滑肌纤维,MOMA染色巨噬细胞。文献支持斑块的稳定性与平滑肌纤维、胶原纤维的含量成正比,与脂质核心、巨噬细胞含量成反比。结果显示AG-NC组稳定性弱于Ctrl组,181b-AG组则强于AG-NC组。同时,还发现181b-AG组巨噬细胞含量低于AG-NC组。切取ApoE-/-小鼠主动脉瓣环处斑块进行巨噬细胞极性的鉴定染色,MOMA+CD86染色阳性即为M1型巨噬细胞,MOMA+CD206染色阳性即为M2型巨噬细胞。染色结果显示,AG-NC组M2型巨噬细胞少于Ctrl组,181b-AG组M2型多于AG-NC组。进一步切去主动脉瓣环处斑块进行Notch1染色,发现AG-NC组Notch1含量高于Ctrl组,181b-AG组Notch1含量低于AG-NC组。最后,我们在293T细胞中进行了miR-181b和Notch1直接靶点关系的验证,发现Notch1为miR-181b的下游靶点。综上,miR-181b通过靶作用于Notch1,影响斑块中巨噬细胞的极性,从而稳定动脉粥样硬化斑块。
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