广西特色民族药材白背叶黄酮类化学成分及质量分析研究

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目的:利用现代分离、分析技术对广西民族特色药材“白背叶”所含黄酮类成分进行较系统的物质基础研究,并对黄酮类成分的提取、纯化工艺进行了研究;在此基础上以整体成分、多成分控制为切入点对其质量控制方法进行提高与完善,所建立的方法能更好地控制白背叶的质量,为充分开发、利用广西白背叶资源提供了科学的依据。  方法:化学成分研究方面:采用系统溶剂提取、柱层析和高效液相色谱法等现代分离技术对“白背叶”乙酸乙酯提取部位进行分离纯化,利用现代光谱、波谱技术对分离得到得到的化合物进行结构鉴定;黄酮类成分提取物方面:采用柱层析技术对白背叶所含黄酮碳苷类成分的提取、纯化工艺进行研究,优化了提取、纯化的工艺参数;质量分析方面:利用高效液相色谱法(HPLC),以Agilent C18(4.6×250mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.1%冰乙酸为流动相,梯度洗脱,流速为1ml/min,检测波长为336nm,以分离、纯化得到的夏佛托苷等3个黄酮碳苷类成分为控制指标,建立了多成分控制“白背叶”质量的含量测定方法,同时采用TLC法鉴别白背叶和HPLC法建立白背叶药材的指纹图谱进行了研究。  结果:化学成分研究方面:从白背叶乙酸乙酯提取部位分离得到了5个化合物,并鉴定了其化学结构,分别是葫芦巴苷Ⅱ、异夏佛托苷、夏佛托苷、大波斯菊苷,洋芹素,其中异夏佛托苷、夏佛托苷为首次从白背叶中分离得到;黄酮类成分提取物方面:以葫芦巴苷Ⅱ、异夏佛托苷、夏佛托苷、大波斯菊苷的含量为指标,通过对提取溶剂、提取方法、柱色谱吸附剂、洗脱溶剂等参数进行提取纯化工艺进行优化,最终确定:以50%乙醇为提取溶剂,大孔D101树脂为吸附剂,先以10%乙醇溶液洗脱去除杂质,继用40%乙醇洗脱,收集40%乙醇洗脱液减压蒸干,该提取工艺得到的背叶黄酮碳苷类提取物的纯度为70.99%;质量分析方面:在所建立液相色谱条件下芦巴苷Ⅱ、异夏佛托苷、夏佛托苷3个成分均达到基线分离,其分别在0.0266~5.320、0.0244~4.880、0.0242~4.840μg范围内线性关系良好(r=0.9990),平均加样回收率(n=6)分别为97.26%、100.09%、103.02%。所建立的液相色谱条件可同时作为白背叶黄酮类成分指纹图谱的色谱条件,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》计算机软件(A版)对10批不同来源的白背叶药材的质量相关性进行了初步研究,结果表明不同来源白背叶所含的黄酮类成分基本相同,但是不同产地白背叶黄酮类成分含量差异较大。  结论:利用现代分离、分析技术对“白背叶”药材所含黄酮类成分进行了较为系统的研究,分离鉴定了5个化合物,其中异夏佛托苷和夏佛托苷为首次从白背叶中分离得到;对白背叶黄酮类成分提取物的提取、纯化工艺进行了研究,优化、确定了最佳的工艺条件,所得到的提取物的纯度为70.99%;在此基础上,采用多指标含量测定与整体黄酮类成分HPLC指纹图谱、TLC薄层鉴别相结合的方法对白背叶的质量控制方法进行提高和完善,可更好地控制白背叶内在质量,为进一步开发、利用白背叶药材资源及其黄酮类成分提取物提供了科学依据。
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