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目的:观察内消散对小鼠实验性前列腺增生的抑制作用,并从调节凋亡相关基因的平衡方面,初步探讨其作用机制,为临床应用提供实验依据。
方法:选用健康雄性成年昆明小鼠,共60只,体重20~25克。随机分为6组:对照组(A)、模型组(B)、前列康组(C)和内消散高(D)、中(E)、低(F)剂量组,每组n=10。模型组、前列康组和内消散高、中、低剂量组小鼠每天皮下注射丙酸睾丸酮(5mg/kg.d),连续28天,诱导其前列腺增生;对照组小鼠每天皮下注射等量溶媒。与此同时,内消散各组分别灌服高(36g/kg.d,相当于临床用量的20倍)、中(18g/kg.d,相当于临床用量的10倍)、低(9g/kg.d,相当于临床用量的5倍)不同剂量的中药煎剂;前列康组灌服前列康水溶液(1g/kg.d,相当于临床用量的10倍);模型组和对照组灌服与前列康组等量生理盐水。28天后称重并处死动物,摘取前列腺、睾丸称重,并计算前列腺指数和睾丸指数。其中前列腺组织用4%多聚甲醛固定,常规脱水、石蜡包埋、切片约5μm,HE染色,观察病理学改变,并采用免疫组化方法检测bcl-2、bax蛋白表达。
结论:
1.以丙酸睾丸酮(TP)诱发小鼠前列腺增生动物模型的前列腺湿重及前列腺指数均高于对照组。光镜下可见模型组前列腺上皮增生,形成密集的皱褶或乳头状结构充满腺腔,管壁增厚;部分腺体周围有结缔组织增生。腺腔内红染物质较少。证明前列腺增生的模型成功建立。
2.本研究在取得了较好的临床疗效的基础上,观察了内消散对前列腺增生的影响。实验结果表明,内消散各剂量组小鼠前列腺湿重、前列腺指数均低于模型组,其中内消散高剂量组的两项指标与模型组的差异较明显;内消散各剂量组腺上皮增生程度均较模型组减轻,其中高剂量组的镜下组织结构与对照组接近。说明本方药对前列腺增生具有抑制作用,且与剂量成正相关关系。有临床应用前景。
3.运用免疫组化方法,观察到内消散组前列腺上皮组织中的bcl-2表达较模型组弱,bax表达则强于模型组,表明中药可能通过调节bcl-2、bax之间的比例变化,促进前列腺增生的上皮细胞凋亡达到抑制增生的目的。当然本实验仅从抗凋亡的角度初步探讨了内消散抑制前列腺增生的作用机制,还需要进一步从其它方面探讨和完善。