论文部分内容阅读
脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是一种严重的神经损伤，可致终生残疾。目前其治疗手段仍十分有限，神经损伤恢复程度仍令人失望。近年研究显示SCI早期免疫炎性反应十分活跃，肿瘤坏死因子(TNF)-α在SCI早期过度表达，提示TNF-α参与了继发性脊髓损伤病理过程。抑制早期的炎性反应可能是治疗SCI的一条新途径。己酮可可碱(pentoxifylline，PTX)是一种非选择性磷酸二酯酶抑制剂，被广泛用于治疗血管性疾病。近年研究表明其具有抑制TNF-α合成，改善微循环等作用。目前，该药对SCI早期TNF-α的影响及神经保护作用尚未见报道。本实验采用WD法建立大鼠脊髓损伤模型，探讨PTX对SCI早期免疫炎性反应的影响及可能机制。 目的： 观察大鼠脊髓损伤后肿瘤坏死因子(TNF)-α及一氧化氮(NO)的变化，及己酮可可碱(PTX)对肿瘤坏死因子(TNF)-α及一氧化氮(NO)的抑制作用，探讨PTX治疗脊髓损伤的机制，为PTX临床治疗脊髓损伤提供依据。 方法： 本实验采用WD法建立大鼠脊髓损伤模型。实验选用体重220-280克成年健康雄性SD大鼠146只(河南省实验动物中心提供)。动物随机分为四组：假手术组(sham operated group，SO组)，17只：损伤组(injured group，IN组)，41郑州大学2004届硕士毕业论文(论文部分)己酮可可碱对大鼠脊髓损伤的影响只;损伤+己酮可可碱治疗组(injured and treated二ith pentoxifylline，PTX组)44只;损伤+甲强龙治疗组(injured and treated，ithmethylprednis01one，MP组)，44只。按z，8，24，4sh将损伤组，治疗组分为4个时间点，每个时间点取8只动物检测TNF一a，各组8h，24h取8只测NO，各组24h取8只测Ca2+，M广，HZO，48h行组织学检查者10只。给药方法和剂量:己酮可可碱组术后给予30 mg/kg体重腹腔注射，每日2次。甲强龙组术后立即给予30 mg/kg体重腹腔注射。指标检测.___ (1)伤段脊髓TNF一a含量测定采用放免法测定 (2)伤段脊髓N0含量测定采用硝酸还原酶法测定 (3)伤段育髓含水量，钙，镁测定采用原子吸收火焰光谱分析法测定，含水量采用干湿重法测定。 (4)病理学常规行HE染色，光镜下观察。 统计数据用，又土s表示，在统计软件SPSS10.O下进行处理，所有数据先行正态性和方查齐性检验，对多组均数的比较采用单因素方查分析，组间两两比较采用LSD检验。a二0.05为检验水准。结果: 1.伤段脊髓组织TNF一Q含量测定 工N组大鼠损伤后各时间点TNF一Q含量均显著高于S0组(P<0.05)，PTX组，MP组均显著低于IN组(P(0.05)，PTX组显著低于MP组(P(0.05)，说明PTX抑制TNF一Q作用优于MP。伤段脊髓组织N0含量测定 IN组与50组相比，8，24h伤段脊髓组织NO含量显著升高(P(0.05)，PTX组MP组均显著低于1N组(P<0.05)，PTX组与MP组相比无显著性差异(P>.05)，说明PTX可以抑制N0，其效果与MP相当。3.伤段脊髓组织内含水量，钙，镁含量测定 含水量:IN组与S0组相比，24h伤段脊髓组织内含水量显著升高(P<0.05)，PTX组MP组均显著低于IN组(P<0.05)，PTX组与MP组相比无显著性差异(P>.05)，说明PTX可以减轻水肿，其效果与MP相当。 钙含量测定:IN组与50组相比，24h伤段脊髓组织钙含量显著升高(P<0.05)，郑州大学20()4届硕士毕业论文(论文部分)己酮可可碱对大鼠脊髓损伤的影响尸TX组MP组均显著低于IN组(P(0.05)，明MP抑制钙内流作用优于PTX。 镁含量测定:IN组与S0组相比，MP组显著低于PTX组(P(0.05)，说24h伤段脊髓组织镁含量显著降低 (P(0.05)，PTX组MP组均显著高于IN组(P(0.05)，MP组显著高于PTX组 (P(0.05)，说明MP升高镁离子作用优于PTX。 4.病理学观察 肉眼见脊髓损伤段肿胀，脊膜下出血，与对照组正常脊髓切片相比，低倍 镜下见灰质及白质间的水肿及出血，出血成点状或片状，高倍镜下见大量红细 胞出现于脊髓损伤组织中，呈急性出血表现。治疗组水肿及出血明显减轻。 结论:1.动物模型的建立 WD法建立动物模型具有以下优点:(1)其病理变化的内容、顺序和时间 与腹侧致伤表现相似，与人类脊髓损伤的性质相似;(2)可以通过手术限度、 撞击力造成不同程度损伤的模型;(3)硬脊膜完整，可防止结缔组织.、组织间 液或其他外源性成分侵入脊髓损伤区。2.损伤后24小时内脊髓组织TNF一Q含量明显升高，表明TNF一a与脊髓损伤有关。3.脊髓损伤后24小时内脊髓组织N0含量明显升高，表明NO参与脊髓损伤病理 过程。4. PTX与MP明显抑制TNF一Q及NO的产生，表明PTX与MP对脊髓损伤有保护作 用。