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香蕉枯萎病是一种系统性维管束病害,分布于世界各地,能对香蕉产业造成毁灭性打击,其病原菌为尖镰孢古巴专化型[Fusarium oxysporum f .sp.cubense (E.F.Smith) snyder et Hansen],隶属半知菌亚门、丝孢纲、瘤痊菌目、镰刀菌属。本研究以香蕉枯萎病原菌生理小种1号、生理小种4号为材料,通过对尖镰孢番茄专化型致病相关基因FPD1的分析,运用同源基因克隆方法,分别从生理小种1号、生理小种4号克隆了致病相关基因FPD1:生理小种1号FPD1基因全长989 bp,含有一个内含子,为47 bp,编码序列长度为942 bp;生理小种4号FPD1基因全长1013 bp,含有一个内含子,为47 bp,编码序列长度为966 bp。运用DNAStar5.0进行了核苷酸序列比对,4号生理小种比1号生理小种多24bp核苷酸,有31个核苷酸位点不同,同源性为99.3%。对生理小种4号FPD1片段,共615 bp,克隆到原核表达载体pET-32a,并将表达表达载体pET-32a-FPD1转化表达宿主菌BL21(DE3),宿主菌经IPTG诱导,通过SDS-PAGE电泳分析,在46KD左右的位置检测到了特异的蛋白质条带,结果表明构建的FPD1片段得到原核表达,将表达的FPD1融合蛋白切胶回收,研磨成粉后加入等体积的福氏不完全佐剂,乳化制备成抗原。免疫家兔四次后,采血收集抗血清,制备了兔抗FPD1多克隆抗体,经过ELISA检测,抗血清的效价达1:10000。本研究还利用改良高氏培养基,分离、筛选获得一株放线菌,命名为:JFA-001。抑菌活性测定结果表明:该菌对香蕉枯萎病菌生理小种1号、生理小种4号病原真菌表现出较强的抑菌活性。分子生物学分类鉴定结果表明:JFA-001菌株同Streptomyce albogriseus的16S rDNA扩增序列同源性达99.7%。