背景：我国逐渐进入老龄化社会，脊柱的退行性疾病已成为临床的常见病、多发病。其中以“腰椎间盘突出症”和“腰椎滑脱症”为主，临床上多表现为反复腰痛及坐骨神经痛，严重影响患者的工作和生活。目前，术中用于脊柱融合的材料存在各种不足，如果能通过人工干预使椎间盘纤维环组织骨化，则既能稳定脊柱，治疗腰椎滑脱，又能防止腰椎间盘髓核突出至椎管内。大量文献证实BMP-2、-4、-7等具有诱导异位骨化的作用，但最近国外有研究显示BMP-6也具有诱导异位骨化的作用，且比BMP-2更高效。目的：建立家兔椎间盘纤维环细胞的体外培养模型，观察家兔纤维环细胞的细胞学特性和生物学特性，研究BMP-6和b-FGF两种生长因子对家兔纤维环细胞成骨潜能的激发作用。方法：1.从健康家兔取出椎间盘纤维环组织，用Ⅱ型胶原酶消化法分离原代椎间盘髓核细胞后，单层培养并以胰酶消化法传代，采用差速贴壁法进行纯化。2.观察纤维环细胞在细胞因子rhBMP-6和b-FGF诱导下成骨表型表达和细胞学特性的变化。按试验中的细胞培养条件分为四个培养组：A组：DMEM/10%FBS培养液；B组：DMEM/10%FBS培养液+b-FGF；C组：DMEM/15%FBS培养液+rhBMP-6；D组：DMEM/15%FBS培养液+rhBMP-6+b-FGF。3.使用光学显微镜观察细胞形态，采用MTT法绘制细胞生长曲线，应用免疫组化法观察各组细胞表达骨桥蛋白（OPN,成骨细胞表达的一种标志性蛋白）的情况，应用Westernblot技术测定并比较各组细胞表达骨桥蛋白量的情况。结果：初贴壁的纤维环细胞呈圆形或生出伪足，状似扇形，随着贴壁细胞的不断增多，细胞逐渐伸展为梭形，传代后呈长梭形或多角形，培养后期呈明显的极性排列、趋化性生长。大约于第四代时细胞胞体变长，胞浆减少，生长变缓。rhBMP-6能够明显增加纤维环细胞对骨桥蛋白的表达；b-FGF能明显促进细胞的增殖；能促进细胞表达骨桥蛋白，但表达量比rhBMP-6少；当联合使用rhBMP-6和b-FGF时，其促进细胞增殖、增加骨桥蛋白的表达的效果要比单独使用一种细胞因子要好。结论：1.本实验成功建立家兔纤维环细胞体外培养模型。原代培养的纤维环细胞主要呈成纤维细胞表型,在细胞传至第四代时，出现老化现象。2. rhBMP-6能够在体外成功诱导纤维环细胞成骨，b-FGF和rhBMP-6在成骨诱导方面具有协同作用。