GroupⅡ intron是催化RNA，可以通过两步连续的转酯反应从前体mRNA中自剪接，连接两侧exon，释放出典型的套索状intron。典型的groupⅡ intron二级结构由六个茎环结构域组成(结构域Ⅰ～Ⅵ)，其中结构域Ⅳ环区包含一个开放阅读框架(open reading frame，ORF)，编码多功能蛋白质，该蛋白质一般具有反转录酶、成熟酶和核酸内切酶三种活性。 本论文研究海洋蓝细菌Trichodesmium erythraeum基因组中groupⅡ intron编码的反转录酶样(RTL)蛋白对groupⅡ intron自剪接的作用。T．erythraeum的核糖核酸还原酶(RIR)基因中包含3个groupⅡ intron，其中第一个groupⅡ intron(以下简称intronⅠ1)和第三个groupⅡ intron(以下简称intron13)都包含一个ORF，该ORF可能编码对intron自剪接和移动有重要作用的RTL蛋白。将Ⅰ1编码序列(删除其中的ORF)插入pDrive质粒载体，构建pDR—1D表达载体。将RTL编码序列插入pAR3质粒载体，构建pAR—RTL2表达载体。因为pAR3和pDrive彼此相容，通过电转化将两种表达载体pAR—RTL2和pDR—1D导入Escherichia coli，筛选得到双质粒菌株，诱导表达，提取总RNA，RT—PCR，琼脂糖凝胶电泳分析鉴定PCR产物，DNA检测显示两条带，一条对应于前体RNA，另一条对应于剪接RNA。首次证明在E． coli中，RIR基因的intronⅠ1编码的RTL蛋白能够帮助intron I1进行自剪接。 将突变的RTL编码序列插入pAR3质粒的PBAD启动子后，构建表达载体pAR—RTLm，与表达载体pDR—1D共同转化Escherichia coli细胞，诱导表达，提取总RNA，RT—PCR，DNA检测显示只有一条前体条带，说明突变的RTL不能帮助intron I1进行自剪接。 另外，将构建含有groupⅡ intron的表达载体pDN1～4(T．erythraeum的DNA聚合酶Ⅲβ亚基基因dnaN包含4个groupⅡ intron dnaN—1，-2，—3，—4，它们都不编码RTL蛋白质)与pAR—RTL2表达载体共同转化Escherichia coli细胞，诱导表达，提取总RNA，RT—PCR，DNA检测显示一条前体条带，也说明了RTL蛋白不能帮助非同源性的intron进行自剪接。 实验证明：在Escherichia coli中，RIR基因的intron I1是在intron自身编码的RTL蛋白的辅助下进行自剪接的，而非宿主体内的蛋白质。RTL蛋白能专一性的帮助编码它的groupⅡ intron进行自剪接，而不能帮助非同源性的groupⅡintron进行自剪接。