罗勒烯信号传导途径高通量活体荧光筛选体系的建立

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haisangpiao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
已有的研究表明:罗勒烯能诱导JA/ET途径的指示基因PDFl.2和SA途径的指示基因PRl的同时表达,说明β-罗勒烯信号传导途径与茉莉酸和水杨酸的并不完全相同。因此,为了高效率地筛选罗勒烯信号传导途径上的各信号传递成分的突变体,进而阐明罗勒烯诱导的防御反应的作用机理,本研究利用正向遗传学的方法成功建立了罗勒烯信号途径的高通量活体荧光筛选体系。获得如下研究结果:1、对防御途径的指示基因PR1、PDF1.2、VSP2启动子区域序列进行调控元件的预测,结果显示:真核生物启动子的核心元件CAAT-box 和 TATA-box 在 PR1、PDF1.2、VSP2基因启动子序列上多个位点出现。除此之外,还存在许多特有的跟防御途径相关的顺式调控元件:L S5、LS7、GCC-box、TGACG-motif、CGTCA-motif等2、成功构建了PR1、PDF1.2、VSP2启动子序列的荧光素酶基因表达质粒PRlpro::Luc、PDF1.2pro::Luc、VSP2pro::Luc。3、将荧光素酶基因表达质粒PRlpro::Luc、PDF1.2pro::Luc、VSP2pro::Luc利用根癌农杆菌介导法转化野生型Col-0拟南芥,利用潮霉素抗性筛选得到R1pro、PDF1、2proT3代转基因纯合子植株,VSP2pro没有得到转基因植株。4、购买了合适的高灵敏CCD相机、暗箱与软件,通过组装调试,成功制造了一台自制的、经济适用的活体荧光检测仪。转基因纯合植株经过茉莉酸、水杨酸或罗勒烯处理和喷施荧光底物后,放到荧光检测仪中,成功观察到了诱导后的转基因植株释放出高亮荧光,说明活体荧光成像检测系统构建成功。这些结果为进一步利用正向遗传学的方法高效筛选罗勒烯信号传导途径中各成分的突变体植株,以及阐明罗勒烯诱导的防御反应的作用机理奠定了良好基础。
其他文献
【正】 近几年来,河北省文物管理处和河北省博物馆等有关单位,曾陆续收集到一批宋、金、元的官印,对当时职官制度和行政区域的研究颇为重要。宋、金官印为汉文,部分刻有颁铸
本文针对目前套管加药需要放掉套压,由套管一次倒入一至二桶药剂的方式,一是放套压后,造成油井生产压差的变化,影响油井正常生产甚至躺井;二是一次性倒入药剂,作用时间短,增
在互联网技术高速发展的今天,越来越多的办公环境被计算机所取代。在大学校园内同样需要很多这样的改变。国家鼓励大学生参与创新创业竞赛,在为期几年的项目实践中收获宝贵经
本文基于2010年对珠三角民营企业在劳动合同、薪酬福利、社会保险、劳动保护、权益受损等方面状况的实地调查,分析了其现状,指出珠三角民营企业劳动关系面临着产业转型缓慢与
劳动教育纳入教育方针,“德智体美劳”五育并举……劳动教育成为今年教育领域的高频热词。劳动教育,应该是素质教育中最厚实、最质朴的部分,以劳树德、以劳增智、以劳强体、以劳
报纸
采用流变学理论,选取Maxwell 模型和HK 模型模拟土石料的流变特性,探讨土石料流变特性对土石坝应力、位移的影响.对梅溪混凝土面板堆石坝实例进行计算分析,结果表明考虑土石料的流变特性
目的 拟在结构化电子病历撰写过程中增加自动划价功能,以规范门诊治疗收费.方法 在结构化电子病历的基础上,将模板中“治疗处置节点”与医院信息系统中“收费项目”进行关联,
非战争军事行动作为人类斗争发展到一定阶段的历史现象,是20世纪90年代初才被提到战略层面加以认识和考察的。随着冷战的结束,原来掩盖在两极格局下的民族矛盾、宗教纠纷、粮食
结合自身平时教学工作,针对备课中学情分析一项进行学习、研讨。从学情分析的内涵和外延着手,体会其对课堂教学工作的意义,以便在今后的教学工作中用好学情分析这个工具。