褪黑素在细菌脂多糖引起胎鼠脑细胞钙超载中的神经保护作用

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目的:通过给妊娠第19天SD孕鼠腹腔注射细菌脂多糖,观察褪黑素对急性分离胎鼠脑细胞内游离钙的影响,探讨褪黑素对脑损伤的保护作用。方法:72只SD孕鼠随机分为:LPS处理组(LPS组)、MT处理组(MT组)、空白对照组,每组24只孕鼠。LPS组和空白对照组分别予腹腔注射LPS(500μg/kg)和等容积生理盐水;MT组孕鼠同时腹腔注射LPS 500μg/kg +MT 10mg/kg。分别于给药后1h、6h、12h、24h、48h、72h剖腹取出胎鼠,急性分离脑组织,新型荧光探针Fluo-3/AM负载胎鼠脑细胞,流式细胞术检测胎鼠细胞内游离钙的平均荧光强度。结果:1、LPS组各小组随着注药后观察时间的延长,脑细胞钙离子荧光值于6h开始明显上升,12h达到高峰,各时间点均明显高于对照组(P<0.001),具有统计学差异。且1h与6h、6h与12h、12h与24h、24h与48h,P均<0.05,均有统计学意义;48h与72h比较,P >0.05,无统计学差异,但仍呈上升趋势。2、MT组72h与LPS组72h组比较P>0.05,无统计学意义,但其值低于LPS组,6h、12h分别与LPS组比较P <0.001,其余各时间点钙离子荧光值均低于LPS组(P <0.05),差异有统计学意义。结论:1、脂多糖通过诱导胎鼠脑细胞内钙离子超载,导致脑损伤。2、细胞内钙超载是胎鼠脑细胞损伤机制的一个重要环节。3、褪黑素通过抑制细胞内钙超载,对脂多糖诱导的胎鼠脑细胞损伤有保护作用。随着对新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)发病机制研究的不断深入,这将为HIE脑损伤的保护治疗提供新的策略与方法。
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