论文部分内容阅读
目的 建立偏侧帕金森病大鼠模型，通过对帕金森病大鼠进行左旋多巴的药物干预，观察左旋多巴治疗前、后纹状体区多巴胺D2受体的变化，探讨左旋多巴对多巴胺D2受体的影响及其影响的机制。 材料与方法 健康Sprague-Dawley（SD）大鼠64只，雄性，体重180—250克。分为四组。模型组：46只，用脑立体定位仪定位，向右侧中脑黑质致密部（SNC）、右侧中脑腹侧被盖区（VTA）分别注射6—OHDA 8μg（4μl）。对照组：6只，向右侧中脑黑质致密部（SNC）、右侧中脑腹侧被盖区（VTA）分别注射生理盐水4μl。假手术组：6只，确定右侧SNC，VTA的坐标，用牙科钻钻颅，露出硬膜，缝合伤口。正常组：6只健康大鼠。术后两周，前三组行腹腔注射APO（apomorphine；APO）0.5mg／kg，诱导旋转行为，若大鼠出现向左侧旋转，记录30分钟内的旋转圈数，平均每分钟7圈以上者为合格的PD大鼠模型。再将成功的帕金森病模型大鼠分为三组（n=6）。6-OHDA组：经APO诱导成功的PD大鼠，3天后取脑行冰冻切片，将切片储存在—20℃冰箱里。6-OHDA+L-DOPA组：每日给予L-DOPA 100mg／kg，腹腔注射15天；6—OHDA+Saline组：每日给予生理盐水1ml，腹腔注射15天。6-OHDA+L-DOPA组、6-OHDA+Saline组PD大鼠疗程结束后，行脑冰冻切片，取以上3组及正常组、对照组、假手术组中脑黑质部位行酪氨酸羟化酶免疫组化染色，纹状体部位行多巴胺D2受体免疫组化染色。浙左大学硕士老戈捆要.结果 术后2周，大鼠行APO腹腔注射诱导旋转，有25只出现向左侧旋转，速度>210/30min。6一OHDA组损毁侧黑质的TH阳性细胞数与正常组、同侧对照组、假手术组相比均明显减少（p<0.001）。6一OHDA组损毁侧纹状体DZ受体阳性细胞数与正常组，同侧对照组及假手术组纹状体D:受体阳性细胞数相比明显增多，差异有显著意义〔p<0 .01)。对照组、假手术组损毁侧纹状体D2受体与正常组纹状体D2受体相比差异无显著意义(眯0.0乡。损毁侧与损毁对侧DZ受体增长百分数与大鼠30分钟的旋转圈数呈线性相关（r=0 .927，P<0.01）。6一OHDA+L一DOPA组大鼠经L一DOPA治疗2周后其纹状体DZ受体阳性细胞数与6一OHDA组、6一OHDA+Sal ine组相比均明显减少，差异有显著意义（p<0 .01）。6一OHDA组、6一OHDA+Sal ine组相比其损毁侧纹状体DZ受体阳性细胞数无明显差异。结论 本实验建立的偏侧PD模型，TH免疫组化染色可见损毁侧黑质致密部DA能神经元大量死亡，与损毁对侧相比残存的神经元只有13.90%左右。可模拟PD病理改变。帕金森病大鼠损毁侧纹状体区多巴胺DZ受体出现明显上调，且损毁侧与损毁对侧的仇受体增长百分数与大鼠30分钟旋转圈数呈线性相关，经L一OPA治疗后可引起多巴胺DZ受体下调。