目的:1.探讨GIOP发病中哪些miRNA差异性表达。2.探讨龟鹿二仙膏干预后GIOP大鼠体内哪些差异miRNA差异性表达。3.通过GO富集分析及KEGG富集分析探讨GIOP发病可能的机制及通路,龟鹿二仙膏治疗GIOP可能的机制及通路。材料与方法:Wistar大鼠48只（3月龄）,分为6组（体重随机法）,包括:正常组、模型组、龟鹿二仙膏高、中、低剂量组、阿仑膦酸钠组,每组8只,雌雄各半。分组后除正常组外其余各组每周2次肌注地塞米松（2.5mg/kg）造模,正常组及模型组予生理盐水灌胃组各治疗组予相应药物灌胃。造模给药9周后,采取腹腔注射5%水合氯醛溶液进行麻醉,取双侧后肢股骨及胫骨。对股骨样本行双能X线吸收检测法（DXA）测各组大鼠骨密度（BMD）,HE法染色后光镜下观察股骨骨组织形态结构,并根据结果筛选出最佳龟鹿二仙膏浓度组。对正常组、模型组及最佳浓度组的胫骨骨组织miRNAs进行高通量测序,筛选出差异性表达的miRNA,预测差异表达的miRNA调控的靶基因,并对预测靶基因结果进行GO富集分析及KEGG富集分析,探讨GIOP的发病机制及龟鹿二仙膏治疗GIOP的作用机制。结果:1.与正常组对比模型组BMD明显降低,差异有统计学意义（p<0.05）,与模型组对比龟鹿二仙膏高、中、低剂量组及阿仑膦酸钠组BMD均有显著升高,差异有统计学意义（p<0.05）,龟鹿二仙膏高、中、低剂量组以中剂量组BMD提升最为明显。2.光镜下观察可见正常组内骨小梁排列紧密,呈网状;模型组内骨细微结构受损,骨小梁变细并断裂,骨小梁稀疏;龟鹿二仙膏高、中、低剂量组及阿伦磷酸钠组骨小梁稀疏、断裂情况均得到改善,骨小梁总数增加且排列渐成网状。3.测序结果表明与正常组对比,模型组有11个miRNA差异表达,其中10个miRNA上调,1个miRNA下调;与模型组对比,龟鹿二仙膏组有18个miRNA差异表达,其中3个miRNA上调,15个miRNA下调;与正常组对比,龟鹿二仙膏组有6个miRNA差异表达,皆上调。4.靶基因预测结果显示与正常组对比,模型组差异表达miRNA预测出靶基因2468个;与模型组对比,龟鹿二仙膏组差异表达miRNA预测靶基因4365个,与正常组对比,龟鹿二仙膏组差异表达miRNA预测出靶基因2582个。5.根据生物信息学分析结果,GIOP的主要发病机制可能为GCs通过p53信号通路等与受体结合,从而影响骨内细胞的寿命与分化,还可通过促进血管动脉粥样硬化改变骨内血供导致骨量下降。而龟鹿二仙膏干预GIOP的主要机制可能为龟鹿二仙膏通过MAPK信号通路等信影响细胞内RNA聚合酶Ⅱ正向调控转录及蛋白质磷酸化等,调节细胞的增殖分化及寿命,此外还可能通过调控鞘脂代谢影响细胞的分化与生长。结论:1.龟鹿二仙膏可提升GIOP大鼠BMD,改善骨微细结构改变,且此作用与miRNA差异性表达有关。2.GIOP的主要发病机制可能为GCs通过p53信号通路、MAPK信号通路及HIF-1信号通路等与骨内细胞膜上的受体蛋白相结合,从而影响细胞的信号转导、转录调控及氧化还原过程,改变细胞内转移酶活性及水解酶活性,进而改变细胞内部结构如细胞核、细胞组成等影响细胞寿命及细胞分化,此外还可能通过与GCs影响骨内血管的调控流体剪应力并导致骨内血管形成动脉粥样硬化从而改变骨内血供有关。3.龟鹿二仙膏干预GIOP的主要机制可能为龟鹿二仙膏通过MAPK信号通路、Wnt信号通路、m TOR信号通路等信号通路结合骨内金属离子或结合细胞膜与细胞核内的受体蛋白,影响RNA聚合酶Ⅱ正向调控转录、蛋白质磷酸化与蛋白质同源二聚体活性等,从而影响细胞内核苷酸的结合及细胞内成分,调节细胞的增殖分化及寿命,此外龟鹿二仙膏还可通过影响细胞膜中的鞘脂代谢影响细胞的分化与生长。