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硒是人体必需的营养元素,在体内发挥着重要的生理、生化功能,如抗氧化、增强免疫力、抗衰老等。汞是剧毒元素,能对人体免疫系统、肾脏、肺和神经系统产生毒理效应,且和许多疾病密切相关。贵州省万山特区是汞暴露地区,由于自然和人为的因素,附近居民面临汞带来的健康风险和增加的氧化性损伤。众所周知,硒能对汞产生拮抗作用,并减少汞在体内的积累。由于硒在体内含量较少,且具有各种不同的形态,所以能否精确测量硒成为一个关键问题。本文开展了硒形态的分析方法研究,并将该方法运用于探究贵州汞暴露地区补硒人群血清中硒形态分布情况及补硒后的生物效应。（1）本文优化了阴离子交换高效液相色谱与电感耦合等离子体质谱联用同时测定不同硒的形态的在线分离检测方法,并将其应用于长期汞暴露人群血清中小分子硒形态的研究。采用不同浓度柠檬酸铵及甲醇作流动相,流动相A为0.5 mM柠檬酸铵溶液+2%（Ⅴ/Ⅴ）甲醇,pH值3.7;流动相B为100 mM柠檬酸铵溶液+2%（Ⅴ/Ⅴ）甲醇,pH值8.0;当利用浓度梯度93% A + 7% B的流动相时,SeCys、Se（Ⅳ）、SeMet、Se（Ⅵ）的保留时间分别为2.48 min,3.28 min,5.19 min,7.02 min,四种硒的形态能完全分离。采用外标法定量,加标回收率在93.0%117.0%之间,相对标准偏差小于9.0%,硒代半胱氨酸、四价硒离子、硒代蛋氨酸、六价硒离子的检出限分别为0.34μg/L、0.67μg/L、1.38μg/L、0.63μg/L （S/N=3）。本方法简单、快速、重现性好,适合于各种生物样品中含硒小分子的形态分析。本方法已成功应用于研究长期汞暴露地区硒干预人群中血清中硒的化学形态,结果表明血清中小分子硒主要是Se（Ⅳ）,补硒后血清中总硒及Se（Ⅳ）含量均增加。（2）本文提出了一种对生物样品中硒形态进行全定量分析的新方法。通过利用反相和亲合色谱结合电感耦合等离子体质谱联用技术,并结合在线同位素稀释法和碰撞池技术的HPLC-ICP-MS联用技术,成功分离和测定了汞暴露地区硒干预人群血清中硒形态,包括含硒蛋白（SelP,SeAlb, GPx）和小分子硒（SeCys, SeMet,无机硒）;与此同时,对连续半年每天服用富硒酵母补硒100ug的汞暴露人群体内血清中硒形态动态分布进行了研究。结果表明:SelP占总硒含量的一半以上,且随着体内总硒含量的增加而增加。连续十次重复测定得出SelP的相对标准偏差为6.0%,SeAlb的相对标准偏差为5.0%。检测限分别为: GPx和其他未保留的硒(0.1μg Se L-1 ), SelP (1.0μg Se L-1 ), SeAlb (1.2μg Se L-1 ),无机硒(1.3μg Se L-1),SeCys (1.2μg Se L-1), SeMet (1.1μg Se L-1)。（3）本研究探索了柱后同位素稀释法高效液相色谱电感耦合等离子体质谱测定含硒蛋白中汞含量的分析方法。SelP中汞的相对标准偏差为5.0%,检测限为1.2μg Hg L-1。结果表明,硒对汞有抑制作用,补硒能减少汞在体内的积累。