经筋微创松解疗法治疗类风湿关节炎临床观察及对Hippo信号通路的影响

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目的:1.通过观察治疗前后中医证候疗效评定、炎性指标、目测类比及疾病活动度评分、红外热图的变化,评价经筋微创松解疗法对类风湿关节炎膝关节的治疗效果。2.通过检测治疗前后类风湿关节炎患者膝关节内滑膜组织Hippo信号通路相关蛋白及基因的表达及关节液中Treg,Th17细胞的含量,观察RA-FLSs的增殖及侵袭能力的变化,探讨经筋微创松解疗法对类风湿关节炎的影响。方法:1.临床研究:选取符合2009年ACR/EULAR制定的RA诊断标准,根据纳入、排除、剔除和脱落标准,最终选择80例存在膝关节疼痛的类风湿关节炎患者随机分为对照组和治疗组,每组40例。对照组采用西药治疗,治疗组采用西药+经筋微创松解疗法治疗。观察治疗前及治疗6个月后两组患者红细胞沉降率、C-反应蛋白、类风湿因子及VAS、DAS28评分的变化,行红外热成像检查,并根据中医证候评分评价其临床疗效。对实验结果进行统计学分析。2.实验研究:根据病例选择标准选取符合实验要求的RA患者12例,分为对照组及治疗组,对照组采取西药治疗,治疗组采取西药+经筋微创松解疗法治疗,分别于治疗前及治疗6个月后抽取关节液,并于针刀镜下取病变膝关节内的滑膜组织标本,制滑膜成纤维细胞(FLSs),分别进行以下实验:①Western Blot检测两组治疗前后RA-FLSs中MST1/2、YAP/TAZ蛋白的表达的变化;②RT-PCR检测两组治疗前后RA-FLSs中MST1/2、YAP/TAZ mRNA水平的变化;③流式细胞术分析两组治疗前后关节液中Treg、Th17细胞含量的变化;④Transwell实验检测两组治疗前后RA-FLSs侵袭能力水平变化;⑤MTT法检测两组治疗前后RA-FLSs增殖能力变化。对实验结果进行统计学分析。成果:1.临床研究:治疗前两组膝关节周围温度、炎症指标(ESR、CRP、RF)、VAS及DAS28评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后则均低于同组治疗前,且治疗组降低更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后中医疗效评定较治疗前改善,且治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.实验研究:①治疗前两组RA-FLSs中MST1/2、YAP/TAZ蛋白表达含量差异无统计学意义(P>0.05);治疗后MST1/2蛋白表达含量高于同组治疗前,且治疗组较对照组增加更为明显,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组患者YAP/TAZ蛋白表达含量均低于同组治疗前,且治疗组较对照组下降更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。②治疗前两组RA-FLSs中MST1/2、YAP/TAZ mRNA表达含量差异无统计学意义(P>0.05);治疗后MST1/2 mRNA表达含量高于同组治疗前,且治疗组较对照组增加更为明显,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组患者YAP/TAZ mRNA表达含量均低于同组治疗前,且治疗组较对照组下降更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。③两组RA患者治疗前关节液中CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞及CD4+IL-17A+Th17细胞占CD4+细胞的百分比含量差异均无统计学意义(P>0.05),两组治疗后CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比含量均高于治疗前,且治疗组较对照组增长更为明显(P<0.05);而两组治疗后CD4+IL-17+Th17细胞百分含量均低于治疗前,且治疗组较对照组降低更为明显(P<0.05)。④两组RA患者治疗前FLSs侵袭能力差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后FLSs侵袭能力均低于治疗前,且治疗组较对照组降低更为明显(P<0.05)。⑤两组RA患者治疗前FLSs增殖能力差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后FLSs增殖能力均低于治疗前,且治疗组较对照组降低更为明显(P<0.05)。结论:1.临床研究:经筋微创松解疗法可显著减轻类风湿关节炎患者膝关节内炎症反应,缓解膝关节肿胀、疼痛、发热等症,并能降低疾病活动度。该疗法是一种新型可视化微创诊疗技术,尤其适用于药物治疗不佳、关节顽固性肿痛的患者,值得临床推广应用。2.实验研究:经筋微创松解疗法可能通过升高MST1/2水平,降低YAP/TAZ水平而调节Th17细胞及Treg细胞的平衡,有效改善关节内免疫紊乱状态。该疗法亦可能通过降低YAP/TAZ水平而改善RA-FLSs生物学行为,使其增殖及侵袭能力明显下降,从而延缓RA的疾病进展。
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