目的：为了进一步分离人肺癌组织特异表达基因和肺癌特异相关基因，采用SMART(Switching Mechanism at 5’ end of RNA Transcript)技术，构建了人肺鳞癌YTMLC90细胞cDNA文库。方法：从培养的人肺鳞癌YTMLC90细胞株中提取总RNA，利用经修饰的oligo(dT)引物(含Sfi ⅠB酶切位点)合成cDNA第一链，同时根据真核生物mRNA 5’端帽子结构特点，利用SMART核苷酸(含Sfi ⅠA酶切位点)作为cDNA第一链在mRNA 5’端延伸出去的模板，进而以此序列为引物利用LD-PCR(long-distance PCR)合成双链cDNA，双链cDNA经Sfi Ⅰ(ⅠA和ⅠB)酶切和过柱分级分离后，克隆入经Sfi Ⅰ酶切的载体后经体外包装而成cDNA文库。结果：人肺癌细胞cDNA文库获得1.01×10~6pfu／ml个重组子，重组率为93.2％，文库扩增后，滴度达5.24×10~9pfu／ml，插入cDNA的长度为750-3000bp。结论：所构建的cDNA文库具有较好的质量，该文库为进一步筛选、克隆肺癌特异表达基因奠定了基础。