由于环境污染、无节制捕捞等原因,很多鱼类的种群数量正在急剧下降;雌雄鱼不同步成熟或存在地域间隔也给育种等工作带来了许多困难,而鱼类精子冷冻保存研究可以很好地解决以上问题.该研究结合四种鱼类的精子生理特点,对传统稀释液进行修改得到了MPRS和TS-2这两种稀释液,其中MPRS是鲈鱼、石鲽和牙鲆三种鱼类精子冷冻保存适宜稀释液,TS-2是大菱鲆精子冷冻保存的优良稀释液.根据鱼类精子小,渗透快的特点,并结合低温生物学原理,在对鲤科鱼类精子冷冻保存方法修改的基础上,我们创立了三步精子冷冻保存方法.测定了在液氮蒸汽中不同位置平衡时的降温速率,研究了降温速率对冻后成活率的影响,确定了精子冷冻保存的最适降温速率.以鲈鱼和大菱鲆精子为材料,研究了抗冻剂对冻后成活率的影响,实验发现10%DMSO冻存效果最好.做了三次大量授精实验,冻精授精率和孵化率与鲜精都没有差异.冻精授精的鲈鱼苗已长大到10cm左右,生长速度与对照没有差异.精子在液氮中保存一年,精子的授精率并没有降低.做了牙鲆卵和石鲽冻精的杂交实验,以证实保存的石鲽精子能同牙鲆卵杂交,为牙鲆♀×石鲽♂实验提供技术支持,杂交苗已发育到变态期,生长正常.做了大菱鲆卵同牙鲆冻精杂交的试验,试图得到了优良的杂交种,但由于两者染色体数不同,亲缘关系较远,尽管有些卵能授精但出膜后全为畸形.