目的：RT-PCR扩增小鼠全长Klotho（KL）cDNA，构建pAAV.mKL重组质粒，验证其在COS-7细胞中的表达情况；重组质粒pAAV.mKL与pHelper和pAAV.RC三质粒共转染AAV-293细胞，包装rAAV.mKL；并利用rAAV.mKL转染SHR大鼠，研究KL过表达对SHR大鼠血压进程及心肌肥大、心肌纤维化的影响，为KL在高血压病及其心脏损伤中的基因治疗提供实验基础。方法：（1）从小鼠肾脏组织中提取总RNA，通过RT-PCR获得全长KL cDNA，将其克隆到pAAV-HnGFP质粒上，构建重组质粒pAAV-mKL，将其转染COS-7真核表达细胞，并通过观察绿色荧光蛋白的表达、RT-PCR和免疫荧光检测KL在COS-7细胞中的表达；（2）应用三质粒共转染的方法将重组质粒转入AAV-293细胞，包装获得rAAV.mKL；（3）应用rAAV.KL转染SHR大鼠，研究KL过表达对SHR大鼠血压进程及其心肌肥大、心肌纤维化的影响。结果：（1）通过RT-PCR获得全长小鼠KLcDNA片断，成功构建重组质粒pAAV.mKL，验证了其使COS-7细胞KL表达增加；（2）三质粒共转染AAV-293细胞，包装出rAAV.mKL，提取病毒DNA，PCR1本课题由国家自然科学基金(30672212)，重庆市卫生局医学科研资助项目(2010-2-079)资助验证rAAV.mKL携带有小鼠KL cDNA片段；（3）KL表达上调可以阻止高血压进程，降低心脏体重指数，抑制心肌肥大和心肌纤维化。结论：通过pAAV.mKL转染COS-7细胞，可以上调其KL的表达。rAAV.mKL感染SHR大鼠，可以抑制血压进一步升高，增加心脏KL表达，减轻心肌肥大及心肌纤维化，表明KL在SHR大鼠血压进程及心脏损伤中起着重要作用。