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目的：依据Aβ毒性学说，海马区注射Aβ25-35建立阿尔茨海默病(AD)动物模型，在此基础上观察VTF、VTP是否改善实验性AD大鼠学习记忆功能障碍及海马组织病理改变；为进一步探讨VTF、VTP治疗 AD的分子机制，以经典AD发病理论“炎症反应学说”“突触受损学说”“APP代谢”“胆碱能损伤”“细胞凋亡假说”为切入点，明确VTF、VTP对AD大鼠的神经保护作用并探讨可能的相关发病机制；此外，以Aβ25-35处理的PC12细胞作为AD细胞模型，研究VTF对Aβ25-35诱导的凋亡相关信号通路PI3K/Akt的影响，旨在为AD的发病机制、寻找防治 AD药物以及研究 VTF、VTP作用靶点提供一定的实验依据。 方法： (1)行为学和形态学实验：双侧海马CA1区注射Aβ25-35建立AD动物模型，采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习和记忆能力，通过尼氏染色和透射电镜技术观察大鼠海马组织神经元形态学变化。 (2)APP代谢作用机制研究：免疫组化检测APP、BACE-1和Aβ1-42的蛋白表达；RT-qRCR、Western Blotting检测APP和BACE-1在基因及蛋白水平的表达。 (3)细胞凋亡机制研究：TUNEL检测不同实验组大鼠细胞凋亡情况；免疫组化法和Western Blotting检测不同实验组大鼠海马Caspase-3的蛋白表达；Aβ25-35诱导PC12细胞损伤，采用WST-1法检测细胞活性；流式细胞术检测VTF对PC12细胞凋亡的影响；Western Blotting检测VTF对PI3K/Akt信号通路在蛋白水平的影响。 (4)炎症机制研究：ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β；免疫组化法检测NF-κBp65的表达；Western Blotting检测p-IкB-α、IкB-α、p-NF-κBp65蛋白的表达；RT-qRCR检测NF-κBp65 mRNA和IкB-αmRNA的表达。 (5)突触可塑性及胆碱能损伤机制研究：生化检测AchE和ChAT活力变化；免疫组化法检测CaM、CREB、BDNF、Syt-1蛋白的表达；Western Blotting检测BDNF、CaM、Syt-1、p-CREB和CREB蛋白的表达；RT-qRCR检测CaM mRNA和CREB mRNA的表达。 结果： (1)行为学和形态学实验：①定位航行实验可明显观察到模型组大鼠找到平台的时间高于其它各组，应用VTF、VTP处理后，逃避潜伏期缩短；撤去平台，AD模型组大鼠穿越有效区域次数比对照组明显减少；VTF、VTP高剂量组穿越有效区域次数与模型组比有所增加；②尼氏染色组织切片显示AD模型组海马区神经元明显疏松，排列紊乱，VTF、VTP组海马神经元损伤明显减轻，染色较深，存在正常形态；透射电镜下，AD模型组大鼠海马CA1区神经元形态不规则，核膜欠清晰，空泡样变性；经VTF、VTP治疗后，大鼠海马 CA1区神经元形态较为规则，凋亡神经细胞较模型组也明显减少。 (2)APP代谢作用机制研究：①与对照组比较，模型组大鼠海马区APP表达上调；用VTF、VTP干预治疗后APP蛋白表达水平明显减少；②与模型组比较，VTF、VTP抑制BACE1蛋白的相对表达量和BACE1的转录水平，同时VTF、VTP组Aβ1-42的阳性表达水平也明显下降。 (3)细胞凋亡机制研究：①Caspase-3蛋白在AD模型组大鼠海马组织活性明显高于对照组，VTF治疗组、VTP治疗组与模型组比较，能不同程度减少海马组织凋亡细胞数并且下调Caspase-3的蛋白表达；②AD模型组细胞活性比对照组明显降低，与模型组相比，VTF能提高细胞活性、减轻Aβ25-35诱导的细胞凋亡；③与对照组比较发现模型组p-Akt/Akt的值明显降低；与模型组比较，VTF治疗组p-Akt/Akt的值明显升高；与LY294002组比较，VTF+LY组p-Akt/Akt的值明显升高。 (4)炎症机制研究：①与模型组比较，VTF高剂量组、VTP高剂量组细胞核p-NF-κB p65的蛋白表达和转录水平明显降低；②VTF、VTP组p-IκB/IκB及IκB-αmRNA的值与模型组比均有不同程度的降低；③VTF、VTP抑制炎症因子TNF-α、IL-6和 IL-1β的产生。 （5）突触可塑性及胆碱能损伤机制研究：①与模型组比较，VTF、VTP各剂量组抑制CaM的表达，CREB mRNA表达量和p-CREB/CREB的值与VTF、VTP剂量呈正相关。②与模型组比较，VTF、VTP组BDNF和Syt-1表达均增加；③模型组大鼠海马组织和血清中AchE活性增高，ChAT活性降低，通过VTF、VTP治疗后，大鼠海马组织和血清中AchE活性明显降低，ChAT活性有所增强。 结论： (1)利用Aβ1-42的核心毒性片段Aβ25-35成功建立AD动物模型；VTF、VTP在一定剂量时可以有效的改善AD大鼠学习记忆能力并且修复海马神经元病理学改变。 (2)VTF、VTP通过下调Aβ生成途径关键蛋白 APP和关键酶BACE1及其下游产物Aβ1-42的蛋白表达水平而调控APP代谢，由此减少Aβ的生成，修复AD大鼠海马神经元病理学改变。 (3)VTF、VTP降低AD大鼠海马组织凋亡细胞数并且下调Caspase-3的蛋白表达，从而抑制细胞凋亡。VTF能够减轻Aβ25-35的神经毒性作用，减少Aβ25-35所诱导的细胞凋亡；VTF促进Akt发生磷酸化，并且对信号通路阻断剂LY294002导致的Akt磷酸化水平降低具有抑制作用，说明VTF具有神经保护作用，通过抗凋亡途径减轻神经细胞损伤。 (4)VTF、VTP从基因到蛋白水平通过抑制NF-κBp65蛋白的表达从而抑制下游炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的释放；VTF、VTP通过抑制IκB-α的磷酸化从而抑制NF-κBp65核转位进而抑制NF-κB/IкB-α信号通路。 (5)Aβ25-35寡聚体可以上调大鼠海马组织CaM蛋白表达和基因转录水平，从而造成大鼠海马神经元的突触性损伤；VTF、VTP能下调大鼠海马组织CaM的蛋白表达和基因转录水平；VTF、VTP能提高大鼠海马p-CREB、BDNF和Syt-1的蛋白表达，VTF、VTP对Aβ25-35诱导的突触性损伤有保护作用，对海马突触可塑性有增强作用。VTF、VTP可以明显降低 AD模型大鼠海马组织和血清中AchE的活力，同时提高ChAT活力，从而改善中枢胆碱能损害。