论文部分内容阅读
目的:检测分析不同人胰腺癌细胞中miR-151a-3p的表达,并研究miR-151a-3p对人胰腺癌细胞增殖、凋亡及周期的影响。方法:从TCGA数据库中筛选出与miR-151a相关的胰腺癌临床数据样本,运用GraphPad Prism 5.02及SPSS 22.0 Statistics软件进行统计学分析,获取miR-151a在胰腺癌组织及正常组织中的表达水平,及其胰腺癌患者的五年生存期及肿瘤切除最大直径。运用qRT-PCR技术检测SW 1990、PANC-1、AsPC-1、BxPC-3四株人胰腺癌细胞中miR-151a-3p的表达水平,选取相对高表达的两株,分别将miR-151a-3p mimic、miR-151a-3p inhibitor通过RNA干扰技术转到其中。然后通过EdU细胞增殖检测试剂盒、流式细胞仪检测miR-151a-3p对人胰腺癌细胞增殖、凋亡及周期的影响,从而探讨miR-151a-3p对人胰腺癌细胞功能学方面的影响。结果:1.miR-151a在胰腺癌患者中呈现差异性表达,与正常胰腺组织相比,无明显统计学差异(P﹥0.05)。2.胰腺癌患者5年生存期的统计分析结果显示,miR-151a高表达的患者较低表达的患者预后差(P=0.0076)。3.miR-151a的表达水平与胰腺癌患者肿瘤切除最大直径无明显关联,差异无统计学意义(P=0.9789)。4.qRT-PCR检测结果显示:miR-151a-3p在四株人胰腺癌细胞中差异性表达(PANC-1﹥BxPC-3﹥AsPC-1﹥SW 1990)。5.通过RNA干扰技术分别将miR-151a-3p mimic、miR-151a-3p inhibitor通过RNA干扰技术转入到PANC-1和BxPC-3胰腺癌细胞株中。qRT-PCR检测结果显示,miR-151a-3p mimic干预后的PANC-1和BxPC-3细胞中miR-151a-3p表达增高;免疫荧光示踪检测结果显示,miR-151a-3p inhibitor干预后的PANC-1和BxPC-3细胞中可见荧光表达。6.细胞增殖结果显示:经过miR-151-3p mimic干预的BxPC-3胰腺癌细胞株的增殖能力增强,而经过miR-151-3p inhibitor干预的BxPC-3胰腺癌细胞株的增殖能力减弱(P<0.05),PANC-1胰腺癌细胞株的增殖能力无明显变化(P﹥0.05)。7.细胞凋亡结果显示:下调miR-151a-3p表达后的PANC-1细胞株细胞凋亡率升高(P<0.05),BxPC-3细胞株细胞凋亡无明显变化(P﹥0.05)。上调miR-151a-3p表达后的PANC-1细胞株细胞凋亡无明显变化(P﹥0.05),BxPC-3细胞株细胞凋亡率降低(P<0.05)。8.细胞周期结果显示:与对照组相比,miR-151a-3p高表达的PANC-1细胞株表现出细胞周期G1期缩短,miR-151a-3p低表达的PANC-1细胞株表现出G1期迟滞,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,miR-151a-3p高表达及低表达的BxPC-3细胞株细胞周期均无明显变化,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论:1、miR-151a在胰腺癌中呈现差异性表达,表达水平越低,胰腺癌患者生存预后相对越好。2、miR-151a-3p在胰腺癌细胞中能促进胰腺癌细胞的增殖、抑制细胞的凋亡及参与G1期的调控。