家蝇幼虫酶解物的制备及其抗氧化活性的研究

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家蝇属昆虫纲、双翅目、家蝇科。其幼虫俗称“蝇蛆”,世代历期短,繁殖力强,人工大规模规范饲养技术成熟,是一种重要的昆虫资源。家蝇幼虫粗蛋白含量高,必需氨基酸的比例和模式都适合人体需要,是非常好的蛋白质资源;另外,其体内还含有多种具有特异生物活性的物质,有很好的开发利用价值。本研究以家蝇幼虫粉为实验材料,采取单因素实验、响应面数据分析、体内外抗氧化活性评价等方法,研究了酶解过程中不同因素对酶解物抗氧化活性的影响、酶解物的体内外抗氧化活性以及酶解物中主要抗氧化的组分。研究结果如下:1.家蝇幼虫的最佳酶解工艺条件为:Alcalase碱性蛋白酶为家蝇幼虫最适水解用酶;加酶量为底物的3.6%、最适pH为8.2、酶解温度为62℃、底物浓度为11.7%、酶解时间为3h。在该酶解条件下家蝇幼虫酶解物的DPPH·清除率达到86.39%(10mg/mL)。2.家蝇幼虫酶解物对DPPH·、O2-·、·OH清除作用以及还原能力均与浓度呈量效关系,IC50分别为3.78mg/mL、8.83mg/mL、1.08mg/mL;家蝇幼虫酶解物能明显抑制亚油酸体系的过氧化和猪油的氧化作用,随着添加量的增加,其抗氧化效果越来越明显。3.家蝇幼虫酶解物可使小鼠血清、肝脏以及脑组织中的SOD活性、GSH-PX活性、CAT活性有明显的提高(p<0.05),使这些组织中的MDA含量明显降低(p<0.05),说明家蝇幼虫酶解物具有一定的抗氧化作用。4.家蝇幼虫酶解物经过SephadexG-25的最佳分离条件为:样品浓度20mg/mL,洗脱液去离子水,洗脱速度0.5mL/min,上样量1mL。在此条件下,家蝇幼虫酶解物经SephadexG-25分离可得到两个组分,经测定组分2的抗氧化活性最高,其分子量范围为2.3KDa~1.2KDa,DPPH·清除率达到88.15%。说明家蝇幼虫酶解物的抗氧化活性与其分子量大小密切相关。
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