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食管癌是最主要的恶性肿瘤类型之一,我国是世界上食管癌的高发地区。同时,食管癌的发生分布在我国也具有地区差异性,如河南省林县,江苏的苏北地区及镇江的扬中等都是食管癌高发地区。为了探究食管癌中表达特异的基因,本研究收集了江苏大学附属医院接受手术治疗的食管癌和肺癌患者的临床标本,每例患者均取手术切除的癌组织及其相应的癌旁组织,利用荧光差异显示的方法,筛选表达差异的基因,并利用实时荧光定量PCR等方法对筛选到基因的表达进行了验证,取得了以下的主要结果:在食管癌组织和对应癌旁组织的对比研究中,应用荧光差异显示技术得到差异条带2条。对这些差异片段进行克隆测序与同源性分析,发现其中1个片段测序结果与人信号转导与激活因子2基因(stat2)高度同源,其同源性为100%。该基因的读码框长2556 bp,编码851个氨基酸,编码蛋白分子量约97.9 KD。应用实时荧光定量PCR方法进一步验证发现该基因在食管癌组织(p＜0.01,n=16)和肺癌组织(p＜0.01,n=16)中的表达量均高于其对应的癌旁组织。C3orf1基因是本实验室利用mRNA荧光差异显示技术筛选出来的一个肺癌相关候选基因,该基因是人类3号常染色体上一开放阅读框,读码框为858 bp,编码了285个氨基酸,分子量约31.4KD。应用实时荧光定量PCR技术比较了16例肺癌组织、16例食管癌组织及其相应的癌旁组织中C3orf1基因的相对表达量,发现C3orf1基因在肺癌组织(p＜0.01,n=16)中的表达量高于其对应的癌旁组织,但在食管癌组织(p＜0.01,n=16)中的相对表达量与其对应的癌旁组织基本没有差异。将C3orf1基因克隆到杆状病毒转座载体pFastBac1中,构建了pFastBac1+C3orf1+gfp重组载体,并转化至受体菌DH10Bac,重组获得重组杆状病毒Bm/Bacmid+C3orf1+gfp的DNA。以此DNA转染家蚕细胞,重组病毒在Bm-N细胞中的表达产物经Western Blot检测,得到一条分子量约为57 kD的特异表达条带,与表达产物的理论值相符。