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兰科(Orchidaceae)是被子植物中最大科之一,是重要的观赏植物与药用植物。兰科菌根真菌的共生对于兰科植物种子萌发和植物生长是必不可少的,兰科植物的保护与产业化发展都离不开菌根真菌。兰科植物与菌根真菌的共生关系是专一性还是多样性,一直存在争议。菌根真菌的可培养分离与鉴定,可有针对性的收集兰科植物菌根真菌资源。菌根真菌研究非培养手段的开发与利用,有助于解决兰科植物菌根真菌分离鉴定困难的问题。对不同地域不同种类中国兰属植物菌根真菌的研究能为确定兰科植物与菌根真菌的共生关系提供新的论据。本论文主要研究结果归纳如下:1、利用可培养手段从四川江津兔耳兰(Cymbidium lancifolium)中分离得到一株菌根真菌,经初步鉴定分析其为角担菌属(Ceratobasidium)真菌;从四川江津寒兰(Cymbidium kanran)中分离得到一株菌根真菌,经初步鉴定分析其为胶膜(Tulasnella)属真菌。2、引物ITS1-OF/ITS4-OF、T2/ITS4、ITS1/ITS4-Tul、CeTh1/CeTh4和S1/ITS4均可用于菌根真菌非培养研究。利用胶膜菌属通用引物T2/ITS4以非培养手段研究浙江兰属植物菌根真菌的侵染率,引物T2/ITS4的扩增片段经测序、比对分析为胶膜菌属真菌rDNA ITS序列,侵染率的统计结果为50.79%,共生关系具属水平专一性与属内多样性。3、对河南信阳兰属植物根状茎菌根真菌进行可培养研究,3株蕙兰中分离到15株不同内生真菌,从4株春兰中分离得到17株不同内生真菌,未分离得到常见菌根真菌。4、利用担子菌通用引物ITS1-OF/ITS4-OF,RFLP与测序相结合的手段对河南信阳兰属植物根与根状茎内生担子菌多样性进行非培养研究,蕙兰根状茎中仅分离得到腊壳菌属(Sebacina)菌根真菌;蕙兰根中分离得到4株不同内生真菌;春兰根状茎中仅分离得到腊壳菌属(Sebacina)菌根真菌;春兰根中分离得到8株不同内生真菌,其中包括腊壳菌属(Sebacina)菌根真菌。5、对湖北、浙江天目山、重庆金佛山、福建武夷山、河南信阳兰属植物进行菌根真菌的非培养研究,发现浙江天目山、重庆金佛山的春兰、蕙兰,湖北的春兰都与胶膜菌属真菌共生;只有河南信阳的春兰、蕙兰与腊壳菌属(Sebacina)菌根真菌共生,由此可见,部分地域的春兰、蕙兰多与胶膜菌属菌根真菌共生,共生关系在属水平上具显著专一性;部分地域春兰、蕙兰与其他菌根真菌共生,共生关系具有多样性。