卵巢恶性肿瘤是女性生殖器常见的三大恶性肿瘤之一,其中卵巢恶性上皮性肿瘤占其85％～90％。虽然手术、化学药物治疗等传统治疗手段不断改进,但卵巢恶性上皮性肿瘤的治疗效果改善甚微,其5年生存率仍徘徊于30％～40％,病亡率居妇科恶性肿瘤之首。临床研究发现卵巢恶性上皮性肿瘤好发于绝经后妇女[1],常伴有卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的升高;而多次妊娠、母乳喂养、口服避孕药的妇女发病风险较低[2],FSH和LH也较低。近20年来,很多研究结果表明FSH对卵巢癌的发生发展起重要作用。最近,越来越多研究结果表明Notch1与肿瘤发生及侵袭迁移有关,但对于其在卵巢癌细胞中和FSH之间的关系却报道甚少。本课题主要研究FSH与卵巢癌细胞中的Notch信号转导通路的关系,通过对不同浓度的FSH与Notch1通路关系的研究,分析FSH不同作用时间与Notch1信号转导通路关系,以及FSH对卵巢癌细胞Notch1信号转导通路下游靶基因表达的调控,探索影响卵巢癌发展的因素,为新的治疗药物和方法提供依据。本课题共分两部分：①卵泡刺激素与卵巢癌细胞Notch1信号转导通路的关系,不同浓度和作用时间的卵泡刺激素对卵巢癌细胞Notch1信号转导通路的激活的影响；②卵泡刺激素对卵巢癌细胞Notch1信号转导通路下游靶基因表达的调控。　　 第一部分：卵泡刺激素与卵巢癌细胞Notch1信号转导通路的关系。　　 目的：研究卵泡刺激素对卵巢癌细胞株SKOV-3和ES-2细胞中Notch1ICD(Notch1 intracellualar domain)表达的影响。　　 方法：⑴将FSH以浓度0及40mIU/ml分别作用于1×105个SKOV-3细胞和6×104个ES-2细胞,其中FSH作用于SKOV-3细胞的适宜时间为48小时,ES-2细胞为24小时,用免疫组织化学的方法分别检测两种细胞中用或者没用FSH刺激后的N1ICD的表达,从而了解FSH与卵巢癌细胞N1ICD表达的关系。⑵将FSH以不同的时间(0、12、24、36、48、72h)和不同浓度(0、10、20、40、80mIU/ml)分别作用于2×106个SKOV-3细胞,将FSH以不同的时间(0、12、24、36、48h)和不同浓度(0、10、20、40、80mIU/ml)分别作用于1×106个ES-2细胞,用Western blot法分别检测NIICD的表达,从而研究不同浓度及作用时间的FSH对N1ICD表达的影响。　　 结果：①用FSH浓度处理后的卵巢癌细胞,相对于未用FSH处理的卵巢癌细胞,其核内可明显的检测到N1ICD的表达。②随着FSH作用时间增加,SKOV-2和ES-2细胞中的Notch1 ICD蛋白含量的表达较对照比较逐渐增强,呈时间效应关系。③随着FSH浓度的增加,SKOV-3和ES-2细胞中的Notch1 ICD蛋白含量的表达较对照比较逐渐增强,呈剂量效应关系。　　 结论：FSH可促进N1ICD的表达。随着FSH浓度和作用时间的增加,卵巢癌细胞中N1ICD的表达也增加。　　 第二部分：卵泡刺激素对卵巢癌细胞notch1信号转导通路下游靶基因表达的影响。　　 目的：研究不同浓度的卵泡刺激素对卵巢癌细胞株SKOV-3和ES-2细胞中Notch1信号传导通路下游靶基因HEY-1,HEY-2和HEY-L表达的影响。从而为进一步的相关研究奠定基础。　　 方法：将FSH以不同浓度(0、10、20、40、80mIU/ml)分别作用于2×106个SKOV-3细胞和1×106个ES-2细胞,其中FSH作用于SKOV-3细胞的时间为48小时,ES-2细胞为24小时。用RT-PCR检测SKOV-3和ES-2细胞中HEY-1,HEY-2和HEY-L mRNA表达。　　 结果：随着FSH浓度的增加,SKOV-3和ES-2细胞中HEY-1、HEY-2和HEY-LmRNA的表达较对照组比较有增加,但没有明显的剂量效应。　　 结论：不同浓度FSH可使卵巢癌细胞中的Notch1信号通路下游靶基因HEY-1/HEY-2/HEY-L的表达有增加。FSH可能有促进N1ICD的表达的作用。随着FSH浓度和作用时间的增加,卵巢癌细胞中N1ICD的表达也增加。不同浓度FSH作用后,SKOV-3和ES-2细胞中HEY-1、HEY-2和HEY-LmRNA的表达可增加。FSH可能通过Notch1通路调节Snail和E-Cadhedn,可能会涉及到EMT的发生。