猪MX1基因在气道上皮细胞SIV感染过程中的表达

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Mx1基因是1964年在A2G小鼠上发现的抗流感病毒感染的基因。干扰素诱导产生的Mx蛋白具有广谱的抗病毒效应,使先天性主动免疫过程中起重要作用的蛋白因子之一。在流感病毒感染的过程中,它可以结合到流感蛋白的NP蛋白上,阻止病毒的增殖,因此具有抗流感病毒功能。猪Mx1基因已确定为猪抗病育种的候选基因。猪流感是对养猪业危害极大的一种传染病,病原为猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)。流感病毒存在于病猪和带毒猪的呼吸道分泌物中。我国猪养殖集约化程度低,即使猪患有流感,也没有引起大规模的爆发,因此我国的主要的商品猪对流感的抗性普遍比较弱,随着集约化饲养的发展,存在猪流感爆发的可能性,一旦爆发就会造成重大损失。因此抗病育种十分重要。本研究培养了SIV能特异性感染的猪气道上皮细胞,建立了干扰素诱导Mx1基因表达的体系,应用实时荧光定量PCR的方法检测Mx1基因的表达情况,探索了最佳诱导时间和诱导浓度。并对细胞在SIV感染早期Mx1基因的表达情况进行了研究。结论如下:(1)猪气道上皮细胞培养体系为DMEM/F12培养基+10%血清+1%双抗。所得细胞能够使SIV在其中增殖。(2) Mx1基因在细胞中的表达随干扰素诱导浓度的增加而增加,最适宜浓度为1000IU/mL。(3) Mx1基因在细胞中的表达不随干扰素诱导时间增加而增加,而是在4h左右达到最高。随后逐渐下降(4) Mx1基因在SIV早期感染中的表达不随时间的增加而增加而是在4-6小时达到最高,随后逐渐下降。其表达趋势与干扰素诱导的表达趋势大致相同。并且其表达趋势与人相近,可能说明猪与人的抗病能力存在某些相似情况,猪与人可能会感染相同的疾病。
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