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诺尼(Morinda Citrifolia L.)是一种多年生树或灌木,属于茜草科,种植于热带和亚热带,主要在波利尼西亚,印度,东南亚,南美和中国海南省等地方,其果实被证实具有抗氧化、抗炎、降脂减肥、改善糖尿病等功能。多糖是诺尼果(Noni fruit)的主要生物活性成分。本研究对从诺尼果提取的多糖进行了分级纯化,然后对诺尼果多糖(Noni fruit polysaccharide,NFP)结构进行表征,最后对其抗炎活性进行了初步探讨。主要研究内容及结果如下:(1)考察了提取时间、提取温度和液料比对NFP提取率的影响,通过正交设计对NFP的最佳工艺条件进行了优化。结果表明:影响NFP提取率的最重要因素是液料比,其次是提取时间,提取温度的影响较小。最佳提取条件为提取时间55min,提取温度95℃,液料比20 mL/g,在此条件下的NFP提取率可达4%。(2)采用凝胶渗透色谱(GPC)确定NFP分级纯化体系的分子量约为456 kDa。离子色谱结果显示:诺尼果多糖主要由半乳糖醛酸,半乳糖,葡萄糖,鼠李糖和阿拉伯糖等五种单糖组成,单糖的相对含量分别为58.44%,4.44%,21.13%,4.84%,2.16%。甲基化分析和核磁共振谱(NMR)分析的结果表明,诺尼果多糖属于果胶多糖,含有半乳糖醛酸聚糖(Homogalacturonan,HG)结构域和鼠李半乳糖醛酸聚糖(Ramnogalacturonan,RG-I)结构域,并伴有少量淀粉类物质。HG结构域是由α-1,4-GalAp聚合而成的线性多糖链,且在O-2或者O-3位可能被乙酰基取代;RG-I结构域的主链由[→2)-α-L-Rhap-(1→4)-α-D-GalAp-(1→]n重复二糖单元构成,C4位可能结合了阿拉伯半乳聚糖(AG)和阿拉伯聚糖。(3)采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立炎症性肠病(IBD)模型小鼠实验,研究NFP对IBD的治疗作用。结果表明:DSS诱导的小鼠的体重相对于正常小鼠明显下降,疾病活动指数(DAI)明显上升,而服用NFP能缓解这些症状。进一步取小鼠的结肠长度进行比较,发现NFP确实能抑制IBD小鼠结肠长度的缩短。最后通过采用苏木精-伊红(HE)染色的结果显示,由于严重的结肠炎,IBD小鼠在其上皮表面上具有许多糜烂。然而,在NFP干预的小鼠仅发现轻度炎症,表明NFP减少了由DSS引起的炎性浸润和隐窝损伤。采用免疫荧光(IF)和爱先蓝-过碘酸雪夫氏(AB-PAS)染色结果表明,NFP不仅促进小鼠杯状细胞分泌黏液,而且促进紧密连接蛋白封闭蛋白(ZO-1)和咬合蛋白(Occludin)的分泌,进一步保护肠粘膜屏障的通透性。综上,本研究较为完整地解析了诺尼果多糖的结构特征,并证实其通过修复肠粘膜屏障而起到治疗IBD小鼠的效果,这将为诺尼果的开发和利用奠定基础。