内脂素的表达与肥胖的相关性研究

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目的:(1)通过检测内脂素基因在维吾尔族肥胖症患者皮下、网膜脂肪组织和血浆中的表达水平,分析其与体重指数、腰臀围比、空腹血糖、血脂等各因素的关系,探讨内脂素与维吾尔族肥胖及其相关疾病的关系。(2)利用3T3-L1细胞株作为体外实验模型,通过观察3T3-L1前脂肪细胞分化成熟过程中内脂素基因表达水平的变化,探讨内脂素在脂肪细胞分化、脂质合成和积聚过程中的作用。方法:根据2000年亚太地区成人肥胖分类标准(BMI≥25kg/m2为肥胖切入点),将56名研究对象分为肥胖组和非肥胖组。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测受试者皮下和网膜脂肪组织中内脂素mRNA表达水平,酶联免疫法检测血浆内脂素浓度。体外培养3T3-L1前脂肪细胞,在3T3-L1前脂肪细胞生长至完全汇合后2天,采用经典的鸡尾酒方法诱导其分化,油红O染色鉴定脂肪细胞分化情况,采用RT-PCR和Western blot的方法鉴定诱导分化不同时间段(0~12天)脂肪细胞中内脂素基因表达量。结果:(1)肥胖组与非肥胖组皮下和网膜脂肪组织内脂素mRNA表达水平比较,虽然差异无统计学意义,但有升高趋势;(2)肥胖组血浆内脂素浓度较正常非肥胖组显著升高(P<0.05);(3)相关性分析显示,网膜脂肪组织内脂素mRNA表达量与BMI(r=0.26,P<0.05)和TG(r=0.55,P<0.05)显著正相关;皮下脂肪组织内脂素mRNA表达量与TG显著正相关(r=0.54,P<0.05),血浆内脂素浓度与体重(r=0.38,P<0.05)、腰围(r=0.33,P<0.05)、臀围(r=0.27,P<0.05)均呈正相关,而与HDL-C呈负相关(r=-0.27,P<0.05);(4)在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中内脂素mRNA表达水平逐渐升高,至分化末期达到较高水平且趋于稳定。其中,诱导分化后第6~12天较分化第0~4天显著升高(P<0.05),诱导分化第10~12天较第6天显著升高。诱导分化第12天较第8天显著升高。(5)免疫印迹结果显示,随着脂肪细胞的成熟内脂素蛋白水平的表达升高。结论:内脂素可能与维吾尔族肥胖及脂代谢有关,体外实验证实内脂素与脂肪细胞分化和脂质积聚有密切的关系。
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