运动锻炼对阿尔茨海默病(AD)认知功能的影响及其机制的探讨

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:ye14382163
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第一部分运动锻炼对早期AD患者认知功能以及血清BDNF、IGF-1的影响目的:给予早期AD患者运动锻炼干预,明确运动锻炼对早期AD患者认知功能的影响,并明确早期AD患者血清BDNF、IGF-1的变化。方法:通过给予40例早期AD患者每周至少3-4次为期1年的运动干预及对照组安慰性干预后,给予神经心理学等量表(MMSE、Mo CA、ADAS-cog、CDR、ADL)评估认知功能及日常生活能力;给予ELISA法对运动干预组及非运动干预组的血清BDNF和IGF-1进行检测。结果:(1)运动锻炼对AD组及正常老年人组干预1年后,AD运动干预组与AD非运动干预组比较,认知下降明显延缓。正常老年人的运动组与非运动组无明显差异。(2)运动锻炼对AD组及正常老年人组干预1年后,AD运动干预组与AD非运动组比较,日常生活能力无明显差异。正常老年人的运动组与非运动组无明显差异。(3)运动锻炼对AD组及正常老年人组干预1年后,AD运动干预组的血清BDNF水平明显增高;而血清IGF-1水平两组间无明显差异。正常老年人的运动组与非运动组BDNF及IGF-1水平无明显差异。结论:运动锻炼可以延缓早期AD患者认知功能的下降,提高血清中BDNF的含量,但对于改善早期AD患者的日常生活能力没有帮助。第二部分运动锻炼对AD动物模型——SAMP8小鼠认知障碍的影响目的:基于临床发现运动锻炼可改善AD患者的认知功能,运用AD动物模型——SAMP8小鼠,明确运动锻炼对SAMP8小鼠认知障碍的影响以及脑内关键递质的变化情况。方法:选用健康的SAMP8小鼠(6月龄)及相对应的SAMR1小鼠(6月龄),随机分为SAMP8小鼠运动组,SAMP8小鼠对照组,SAMR1小鼠运动组,SAMR1小鼠对照组。运动组给予为期4周的运动干预。运用RT-PCR法及Western Blot法测定SAMP8小鼠和SAMR1小鼠海马部位APP的表达情况;运用Nissle染色测定SAMP8小鼠和SAMR1小鼠海马部位神经元存活情况;运用荧光染色测定SAMP8小鼠和SAMR1小鼠海马部位神经细胞凋亡的情况;运用Morris水迷宫实验检测小鼠的认知功能。结果:(1)SAMP8小鼠在海马部位RNA水平APP表达均显著高于SAMR1小鼠(P<0.01);SAMP8小鼠在海马部位蛋白水平APP表达也显著高于SAMR1小鼠(P<0.01)。(2)Nissle染色的实验结果表明:SAMP8小鼠在海马部位神经元细胞(Nissle染色阳性)的表达显著的低于SAMR1小鼠(P<0.05);荧光染色的实验结果表明:SAMP8小鼠在海马部位神经元细胞凋亡(Fluoro-JB染色阳性)的水平显著的高于SAMR1小鼠(P<0.01)。(3)给予每组(8只)包括SAMP8小鼠和SAMR1小鼠主动运动锻炼4周,4周后给予Morris水迷宫实验连续测试5天,与SAMR1小鼠相比较,SAMP8小鼠的逃避潜伏期明显延长,差异具有显著地统计学意义(P<0.001);与SAMP8对照组小鼠相比较,SAMP8运动组小鼠的逃避潜伏期明显缩短,差异具有显著地统计学意义(P<0.001);与SAMRl组相比较,SAMP8组小鼠在平台象限内游泳时间明显缩短,差异有显著地统计学意义(P<0.001);与SAMP8对照组小鼠相比较,SAMP8运动组小鼠在平台象限内游泳时间明显增加,差异具有显著地统计学意义(P<0.001)。(4)SAMP8小鼠经过4周的运动锻炼,SAMP8小鼠运动组的海马部位APP蛋白的表达显著低于SAMP8小鼠对照组(P<0.05);并且SAMP8小鼠运动组的海马部位的神经元细胞凋亡(Fluoro-JB染色阳性)的水平显著的低于SAMP8小鼠对照组(P<0.05)。结论:运动锻炼可以改善SAMP8小鼠的认知功能,减少SAMP8小鼠海马部位APP的表达和神经细胞凋亡。第三部分mi R-132在运动锻炼对SAMP8小鼠认知障碍的影响中的作用目的:明确mi R-132在运动锻炼对SAMP8小鼠认知障碍的影响中的作用方法:选用健康的SAMP8小鼠(6月龄)及相对应的SAMR1小鼠(6月龄),随机分为SAMP8小鼠运动组,SAMP8小鼠对照组,SAMR1小鼠运动组,SAMR1小鼠对照组。运动组给予为期4周的运动干预。运用q RT-PCR法及原位杂交法测定SAMP8小鼠和SAMR1小鼠海马部位mi R-132的表达情况。选用健康的SAMP8小鼠,双侧海马分别注射mi R-NC,mi R-132-agomir以及mi R-132-antagomir后给予主动运动锻炼48h,Morris水迷宫实验检测小鼠的认知功能。结果:(1)运动锻炼干预前测定SAMP8小鼠及其对照SAMR1小鼠各部位mi R-132的表达情况:海马部位SAMP8小鼠与SAMR1小鼠相比,mi R-132的表达量显著增加,有显著的统计学差异(P<0.01)。给予运动锻炼4周后,运用q RT-PCR测定各组小鼠海马部位的mi R-132的表达情况:SAMP8对照组小鼠与SAMR1对照组小鼠相比,mi R-132的表达量显著增加,有显著的统计学差异(P<0.01);SAMP8运动组小鼠与SAMP8对照组小鼠相比,mi R-132的表达量显著减少,有统计学差异(P<0.05)。同时我们也运用原位杂交法测定各组小鼠海马部位的mi R-132的表达情况:SAMP8对照组小鼠与SAMR1对照组小鼠相比,mi R-132的表达量显著增加,有显著的统计学差异(P<0.01);SAMP8运动组小鼠与SAMP8对照组小鼠相比,mi R-132的表达量显著减少,有统计学差异(P<0.05)。(2)Morris水迷宫实验结果显示:与SAMP8-mi R-NC小鼠相比较,SAMP8-mi R-132-antagomir小鼠的逃避潜伏期明显缩短,差异具有显著地统计学意义(P<0.01);SAMP8-mi R-132-agomir小鼠的逃避潜伏期明显延长,差异具有显著地统计学意义(P<0.05);与SAMP8-mi R-NC小鼠相比较,SAMP8-mi R-132-antagomir小鼠在平台象限内游泳时间明显增加,差异具有显著地统计学意义(P<0.001);SAMP8-mi R-132-agomir小鼠在平台象限内游泳时间明显减少,差异具有显著地统计学意义(P<0.001)。结论:运动干预后的SAMP8小鼠海马部位mi R-132的表达明显降低。在SAMP8小鼠的海马部位注射mi R-132激动剂可加重SAMP8小鼠的认知受损,而注射mi R-132拮抗剂可改善SAMP8小鼠的认知功能。mi R-132可能是运动干预改善SAMP8小鼠的认知功能的调控关键分子。
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