髓过氧化物酶电位型免疫传感器的实验研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiffylube
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目的:研制一种检测人血清中的髓过氧化物酶的免疫传感器,从而有效准确的预测三个月到两年内被测者患严重心血管疾病的可能性。方法:1.将Nafion膜吸附到玻碳电极表面,通过静电吸附和共价键合作用将硫堇和纳米金颗粒层层自组装到Nafion膜修饰的电极表面;2.再通过形成的纳米金单层吸附髓过氧化物酶(MPO)抗体;3.最后用辣根过氧化物酶(HRP)封闭电极上的非特异吸附位点,同时起到放大响应电流信号的作用,构建一种检测髓过氧化物酶(MPO)的新型电流型纳米免疫传感器检测人血清中的MPO。结果:1.该免疫传感器对MPO的响应特性良好,其线性检测范围2.5~100μg/L,检出限为0.86μg/L;2.该生物传感器达到95%稳态响应时间<30 s,批间、批内的变异系数分别<2.94%和4.15%;3.探讨了抗体浓度、底物浓度、pH、温度及其它干扰物质等对该传感器的影响;4.使用本方法和经典的酶联免疫吸附实验(ELISA)同时对40份人血清标本MPO进行测量,结果表明两者相关性良好(r=0.9971,p<0.0001)。结论该电流型纳米免疫传感器具有灵敏度高、特异性好、不需标记和可以重复测量等优点,是一种检测MPO的新方法,可以通过简单的操作从而预测心血管疾病危险性,适用于临床检测,有推广价值。
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