溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)又称慢性非特异性溃疡性结肠炎,是一种病因尚未明确的慢性疾病,以大肠(直肠与结肠)粘膜与粘膜下炎症为病变的主要特征。本课题研究以长期应用于临床治疗UC且行之有效的中药复方溃结饮的临床资料为基础,进行口服用药与灌肠给药的比较性分析,从宏观角度观察不同给药途径在不同时间段对模型动物的作用特点,并从微观角度对其抗炎作用机制进行比较,以获得合理选择给药途径、制定综合临床方案的实验依据,进而为临床治疗提供指导。 本实验应用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法制备UC大鼠模型,将造模动物随机分为模型组、奥沙拉秦钠(阳性对照药)组、溃结饮灌胃组、溃结饮灌肠组,另设正常组同步饲养,分别在给药后1周、2周和4周末将1/3动物杀检取材,观察指标如下: 1 从宏观角度观察溃结饮不同给药途径对UC大鼠的影响 (1)对机体整体生存状态的影响:包括大鼠一般情况和体重的变化。 (2)对结肠受损粘膜局部的作用:观察粘膜大体形态及镜下病理形态,并作病变程度评分。 2 从微观角度比较溃结饮不同给药途径治疗UC的抗炎作用机制 (1)抑制前炎性细胞因子及愈合后复发的相关细胞因子表达的的作用:观察血清肿瘤坏死因子(TNF)-α与IL-8含量的变化,并观察粘膜局部TNF-α的表达情况。 (2)对起保护与损伤粘膜双重作用的一氧化氮(NO)及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响:观察血清NO含量的变化及粘膜局部iNOS的表达情况。 实验结果表明: (1)不同给药途径对UC大鼠的整体生存状态和局部结肠粘膜的影响: 在改善大鼠的一般情况和促进体重恢复方面,溃结饮灌胃或灌肠均可从急性期即发挥作用,溃结饮灌肠的作用优于溃结饮灌胃,且溃结饮灌肠的作用可持续至慢性期,其远期效果较好。 在抑制局部粘膜损伤及促进粘膜修复方面,溃结饮灌胃或灌肠给药均有作用,在急性期的早期溃结饮灌胃能抑制血管炎而溃结饮灌肠可局限溃疡形成的范围,至急性期后期及慢性期溃结饮灌胃抑制迟发性炎症及促进肉芽组织生成的作用优于灌肠(在本实验中可能与TNBS的作用机制有关),但溃结饮灌肠促进肉芽组织成熟的作用优于灌胃;对病理评分进行秩和检验结果显示,相对于模型组,溃结饮灌胃或灌肠组Ⅲ级(重度)炎症的比例显著减小,二者均有减轻炎症程度的作用。 (2)不同给药途径治疗UC抗炎作用机制的比较 在抑制血清前炎性细胞因子及愈合后复发的相关细胞因子表达方面,在急性期溃结饮灌胃或灌肠均有下调模型动物上述指标高表达的作用,在急性期的早期溃结饮灌胃作用优于溃结饮灌肠;至急性期的后期则灌肠给药下调TNF-α的作用与灌胃给药接近,下调IL-8的作用优于灌胃;至慢性期二者均无显著作用。 在影响粘膜局部TNF-α表达方面,从急性期至慢性期,3组治疗均有下调模型动物粘膜TNF-α高表达的作用,在急性期,溃结饮灌肠和奥沙拉秦钠的作用均优于溃结饮灌