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目的:研究短发夹状RNA（shRNA）干扰对子宫内膜癌细胞（RL95-2）中HMGB1基因表达及细胞增殖的影响。方法:观察由HMGB1基因的shRNA真核表达质粒pGPU6/GFP/Neo介导的HMGB1shRNA对子宫内膜癌细胞（RL95-2）增殖的影响,将HMGB1基因的shRNA真核表达质粒pGPU6-shRNA转染人子宫内膜癌细胞系RL95-2细胞中。实验分组如下:①实验组（RL95-2 HMGB1/p-shRNA）②空载体对照组（RL95-2/p）③转染试剂对照组（RL95-2/mock-contr01）④阳性对照组（RL95-2GAPDH/p-shRNA）⑤阴性对照组（RL95-2 HMGB1/p-NC）⑥空白组（RL95-2）。用实时荧光定量RT-PCR检测转染重组质粒后各组细胞的HMGB1mRNA的表达效应,Western-blot法检测转染重组质粒后各组细胞的HMGB1蛋白水平的表达,四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测转染重组质粒后各组细胞的增殖状况,每组重复试验5次,取3次结果计算,以均数±标准差表示。结果:（1）重组质粒pGPU6-HMGB1shRNA核酸序列分析结果显示,靶向HMGB1基因的shRNA模板片段已经插入到RNAi专用的pGPU6/GFP/Neo Express质粒中,测序结果与设计完全一致。（2）重组质粒转染后可见绿色荧光蛋白表达示转染成功,且观察到转染率最高可达到（73.267±1.626）%。（3）RT-PCR:将HMGB1 pGPU6-shRNA转染RL95-2细胞后2d,实验组的HMGB1mRNA表达量是空白组的0.05倍,差异有统计学意义(2-ΔΔCt＜0.5),实验组和阳性对照组比较差异无统计学意义,空载体对照组、转染试剂对照组、阴性对照组和空白组两两相比较差异均无统计学意义。（4）Western-blot法:将HMGB1pGPU6-shRNA转染RL95-2细胞后2d,实验组的HMGB1蛋白相对表达量为0.153±0.004,与空白组的0.568±0.005相比较,差异有统计学意义（p＜0.05）;与阳性对照组的0.158±0.006相比较,差异无统计学意义;空载体对照组、转染试剂对照组、阴性对照组和空白组两两相比较,差异均无统计学意义。（5）MTT比色法检测显示:在转染后的1 d、2d、3d、4d、5d,实验组、阳性对照组和空载体对照组、转染试剂对照组、阴性对照组、空白组相比较,增殖明显减慢,且差异有统计学意义（p＜0.05）,而实验组和阳性对照组相比较,差异无统计学差异,空载体对照组、转染试剂对照组、阴性对照组和空白组两两相比较,差异无统计学意义。结论:RNA干扰技术能有效抑制靶基因HMGB1的表达并可抑制子宫内膜癌细胞增殖,可能为子宫内膜癌的基因研究及治疗提供新思路。