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刺梨(Rosa roxburghii Tratt.)为蔷薇科蔷薇属落叶灌木,多分布于海拔10 00~16 0 0 m的山区和丘陵地带,为云贵高原特有的野生资源,适应性强,易栽种,且刺梨果实中含有大量黄酮、维生素、多糖等药理成分。但目前刺梨的开发利用程度较低,仅限于刺梨果脯、果汁的加工利用,且相关的研究报道不够系统、深入,本文以采自贵州的刺梨果实为原料,研究刺梨黄酮的提取、分离工艺,并对刺梨黄酮进行抗氧化活性跟踪,旨在为刺梨资源的综合开发利用提供理论依据。研究的主要内容与结果如下:(1)以黄酮提取量为指标,采用半仿生法,以乙醇溶液作为提取溶剂,通过单因素试验和响应曲面法优化刺梨黄酮的提取工艺,探讨乙醇浓度、料液比、温度和时间4个因素对提取效果的影响,得到最佳工艺条件为乙醇浓度80%、料液比1∶15(g∶m L)、提取温度90℃、提取时间80∶40∶40(min),总黄酮提取量可达27.70 mg/g,即刺梨黄酮粗提物质量分数为8.41%。(2)通过比较8种大孔树脂对刺梨黄酮的吸附和解吸能力,确定AB-8大孔树脂为最佳;通过静态试验和动态试验,确定了刺梨黄酮粗提物精制的最佳工艺:柱子规格1.6 cm×50 cm,填料径高比1∶22.5;吸附质溶剂:水,p H自然;洗脱剂:80%乙醇,p H为6;上样浓度:5 mg/m L;上样速度:1.5 m L/min;上样量:8.5 BV;洗脱速度:1.5 m L/min;洗脱量:2.5 BV。制得刺梨黄酮精制品的质量分数为37.24%,纯化倍数为4.4倍。(3)采用高效液相色谱法将刺梨黄酮精制品进一步分离,得到组分Ⅰ、Ⅱ。通过紫外光谱、HPLC和质谱进行初步定性分析,结果表明,2个组分为黄酮类化合物,且组分Ⅰ为槲皮素,组分Ⅱ为山奈酚。(4)研究刺梨黄酮粗提物、精制品、组分Ⅰ和组分Ⅱ的抗氧化活性。结果表明,待测样品的浓度和其抗氧化活性呈现线性关系。4个待测样品中,粗提物的还原力、总抗氧化能力、对(·OH、·O2-)自由基的清除能力均显著低于其余待测样品(P<0.05);但是其对DPPH·自由基的清除能力显著高于精制品(P<0.05)、组分Ⅰ和组分Ⅱ;4个样品的抗脂质过氧化能力差异不显著(P>0.05)。刺梨黄酮的半数抑制率(IC5 0)的研究结果显示:在试验范围内,刺梨黄酮浓度与抗氧化活性呈线性关系,且待测样品的IC5 0值与芦丁标准品的IC5 0值近似,IC5 0值越小说明抗氧化性越强,由此说明刺梨黄酮具有较强的抗氧化活性。