【摘 要】
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窄叶鲜卑花是藏族民间的常用药物,现代药理学研究表明,窄叶鲜卑花具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、调节免疫系统和抗肝损伤等多种功效,其中萜类成分是其降脂作用的主要活性成分。本文基于表面分子印迹技术,结合虚拟模板分子,成功制备具有核-壳结构的磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物,并进行一系列结构表征和相关吸附实验,从窄叶鲜卑花粗提物中成功分离富集目标化合物。本文主要研究内容和结论如下:(1)目标化合
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窄叶鲜卑花是藏族民间的常用药物,现代药理学研究表明,窄叶鲜卑花具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、调节免疫系统和抗肝损伤等多种功效,其中萜类成分是其降脂作用的主要活性成分。本文基于表面分子印迹技术,结合虚拟模板分子,成功制备具有核-壳结构的磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物,并进行一系列结构表征和相关吸附实验,从窄叶鲜卑花粗提物中成功分离富集目标化合物。本文主要研究内容和结论如下:(1)目标化合物Sibiskoside的分离及鉴定:采用连续热回流乙醇溶液提取法、系统溶剂分离法、正相硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱和制备液相色谱等分离纯化方法以及核磁和质谱技术,从窄叶鲜卑花地上部分的95%乙醇粗提物中,分离并鉴定得到目标化合物Sibiskoside1.1 g,纯度达到92.21%。(2)磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物(DMIPs)的制备:采用水热法合成磁性Fe3O4纳米颗粒,进一步接枝改性后合成具有超顺磁性的Fe3O4@Si O2@C=C微球,并以此为载体,京尼平苷为虚拟模板分子,4-VP为功能单体,EGDMA为交联剂,AIBN为引发剂,在乙腈溶液中合成DMIPs。(3)聚合物材料的结构表征:采用SEM、FT-IR、接触角、TGA、VSM和XRD等方法,对磁性纳米材料和印迹材料进行一系列表征测试,分析聚合物材料的表面形貌、粒径大小、官能团结构、亲水性、热稳定性、磁饱和强度及晶型稳定性,证明在聚合反应过程中,成功制备得到Fe3O4纳米颗粒、Fe3O4@Si O2微球、Fe3O4@Si O2@C=C微球、DMIPs和DNIPs,并且都具有较好的尺寸大小、规则球形和超顺磁性,印迹材料的热稳定性良好,DMIPs还表现出较好的晶型稳定性。(4)印迹过程提取条件的优化:对磁性表面功能化虚拟模板分子印迹聚合物在印迹吸附过程中的提取条件进行优化,包括温度、p H值和溶剂环境。实验结果表明,当温度为35℃、p H值为弱碱性、溶剂为甲醇时,DMIPs对目标化合物Sibiskoside具有最佳的吸附效果。(5)吸附性能实验和机理的研究:吸附动力学实验和模型研究结果表明,印迹吸附材料在40 min左右可以达到吸附平衡,与DNIPs相比,DMIPs对目标化合物Sibiskoside的吸附速度更快,二级动力学模型对印迹材料的吸附过程具有更高的拟合相关系数,因此占主导地位。等温吸附实验和模型研究表明,DMIPs对Sibiskoside的最大吸附量能达到14.67 mg/g,Freundlich模型的拟合结果更贴近印迹材料的吸附过程,说明吸附过程较容易进行,印迹吸附材料以表面不均匀、多分子层吸附为主。选择性吸附实验表明,与竞争性化合物穿心莲内酯、虎杖苷、熊果苷、咖啡酸、新橙皮苷二氢查耳酮和槲皮素相比,DMIPs的印迹因子最高,达到2.08,选择性分离系数分别为1.73、1.23、1.50、1.49,3.73和8.91,说明DMIPs对Sibiskoside有较好的选择性识别能力。DMIPs的重复利用性较好,在实际应用中,DMIPs对Sibiskoside的吸附要高于对窄叶鲜卑花粗提物中其他组分的吸附,纯度达到78%,可以初步用于窄叶鲜卑花中单萜类成分的分离与纯化。
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