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目的:通过体外胃癌上皮细胞与幽门螺杆菌(H.pylori)共同孵育,研究H.pylori对人胃癌细胞株SGC-7901(人低分化腺癌细胞株)增殖和凋亡的影响及其与抑凋亡基因Survivin、Bcl-2 mRNA表达的关系,以寻找H.pylori对胃癌细胞生长的影响机制。
方法:观察不同浓度(1.6x10<4>～1.6x10<7>cfu/ml)H.pylori菌株ACTT49503与人胃癌细胞SGC-7901共同孵育12、24、48、72小时,胃癌细胞形态学、细胞增殖、凋亡及Survivin、Bc1-2 mRNA表达的改变。在光学显微镜下观察细胞形态学,MTT分析H.pylori对细胞增殖的影响,EB/AO荧光染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Survivin、Bc1-2 mRNA在H.pylori作用前后的表达情况。
结果:细胞形态学观察发现SGC-7901细胞与低浓度H.pylori(1.6x10<4>cfu/ml、1.6x10<5>cfu/ml)共孵育48h后,细胞形态较对照组无明显差别。SGC-7901细胞与高浓度H.pylori(1.6x10<6>cfu/ml、1.6x10<7>cfu/ml)共孵育48h后,细胞质内出现空泡病变。MTT检测发现低浓度H.pylori共孵育组,细胞生存率较对照组显著增加(P<0.01);而高浓度H.pylori共孵育组,细胞生存率较对照组显著减少(P<0.05),且浓度越高,抑制越明显。EB/AO染色测定细胞凋亡指数统计学分析表明:低浓度H.pylori共孵育组,细胞凋亡指数较对照组无明显差异(P>0.05);而高浓度H.pylori共孵育组,细胞凋亡指数较对照组显著增加(P<0.05),且H.pylori浓度越高,凋亡指数越高。RT-PCR检测发现低浓度H.pylori组,Survivin、Bc1-2表达上调;而高浓度H.pylori组,Survivin、Bc1-2表达下调。
结论:不同浓度H.pylori对胃癌细胞增殖和凋亡的不同影响,机理可能与抑凋亡基因Survivin、Bc1-2不同表达有关。H.pylori在低浓度(1.6x10<4>cfu／ml、1.6x10<5>cfu／m1)时可促进SGC-7901增殖，Survivin、Bc1-2的表达上调：在高浓度(1.6x10<6>cfu／ml、1.6x10<7>cfu／m1)时可抑制细胞SGC-7901增殖，促进细胞凋亡，Survivin、Bcl-2的表达下调。