不同大小和不同年龄段大鼠背根神经节中HCN通道特性研究

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疼痛作为一种复杂的生理和心理活动,与个体的性别,种族和年龄有很大的相关性。已经有研究证实,随着年龄的变化,机体对疼痛的敏感度也会发生相应的变化。背根神经节(dorasl root ganglion,DRG)属于初级感觉神经,并且在神经传递中起着重要功能作用,不同大小的DRG神经元在信号传导过程中起到的功能和作用也不相同。一般来说,机体受到刺激,细胞膜上的相关离子通道就会产生相应的变化,这构成细胞兴奋的基础,同样也是生物电生理现象的基础。有研究表明,超过60%的疾病都和离子通道有关,即膜蛋白的功能水平和表达水平上发生了变化。一般将离子通道可以分为电压门控离子通道、配体门控离子通道、胞内信号门控通道和机械敏感通道四种类型。超极化激活的环核苷酸门控(Hyperpolarization activated cyclic nucleotide-gated,HCN)通道是一种由cAMP和电压共同调控的阳离子通道,对阳离子通过具有非选择性,参与多种神经活动,如调控静息电位,信号传递和突触整合,在大鼠的初级感觉神经DRG中,HCN通道在对动作电位产生的频率和振幅和对细胞兴奋性的调控上起到重要作用。为了研究不同大小和不同年龄段的DRG神经元上HCN通道特性,我们使用急性分离的大鼠背根神经节细胞进行膜片钳全细胞实验,通过超极化电压刺激记录不同年龄段不同大小的DRG神经元上HCN通道电流,并通过计算得到不同细胞电流密度(Current Density),半激活电压(V1/2)和激活动力学(Kinetics)等相关通道参数。应用单细胞RT-PCR技术研究不同大小和不同年龄段大鼠背根神经节中单个神经细胞上HCN通道四种亚型的转录水平,通过单细胞RT-PCR技术对HCN通道电流发生的变化寻找相应的分子水平依据。实验发现,V1/2会随细胞大小和年龄段的变化而变化,在老年鼠的中小DRG细胞中的HCN1和HCN3有较弱的表达,新生鼠的HCN2和老年鼠的HCN4也有较弱的表达,这也许是由于衰老的作用,单细胞RT-PCR转录水平实验结果与电生理数据相符合。这对我们研究不同年龄段的神经元的生理和病理功能非常重要,有助于解释疼痛在不同年龄段人群中产生的差异性。
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