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目的: 探讨转染脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor BDNF)基因的骨髓基质细胞在宿主缺血区的基因表达情况,以及对神经功能的保护作用。
方法: 用阳离子聚合物介导法将BDNF基因转染到大鼠骨髓基质细胞中。免疫组化染色检测转基因骨髓基质细胞BNDF蛋白表达情况。建立大鼠大脑中动脉梗塞模型(tMCAO),并将其随机分成:(1) 对照组(2) PBS移植组(3) 骨髓基质细胞移植组(4) 转基因骨髓基质细胞移植组,每组各8只SD大鼠。立体定向法将BrdU标记的转基因骨髓基质细胞移植到tMCAO大鼠的纹状体缺血半暗带。移植后1~30天对各组进行神经损害严重程度评分(NSS)并相互比较。用免疫组化染色方法观察移植后30天转基因骨髓基质细胞在脑内的基因表达及增殖、分化情况。
结果: 骨髓基质细胞转基因24小时后就有BDNF蛋白的表达。移植后1天、7天、14天、21天、30天转基因骨髓基质细胞移植组大鼠的NSS评分分别为7.0±1.6、5.6±1.5、5.0±0.8、4.6±1.0、4.0±0.5除第1天评分与PBS移植组及骨髓基质细胞移植组无显著差别外,其余均低于以上两组。转基因骨髓基质细胞移植后30天在宿主脑内存活并表达BDNF蛋白,免疫组化染色显示转基因骨髓基质细胞移植组较骨髓基质细胞移植组BDNF阳性细胞数显著增多(P<0.05);移植后30天免疫组化染色显示转基因骨髓基质细胞移植组NSE、GFAP阳性细胞数较其它三组显著增多(P<0.05)。
结论: 转染BDNF基凶的骨髓基质细胞移植后在缺血区能够表达基因产物,并通过增加神经元及神经胶质细胞的数量对宿主的神经损伤具有修复作用。转基因骨髓基质细胞移植是治疗脑缺血性疾病的可行途径。