缺血性卒中患者exosomal microRNA表达及临床意义研究

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背景:外泌体(exosomes)是一种纳米级细胞外囊泡,参与细胞间的物质传递及信号转导。近年来外泌体microRNA(exosomal miRNA)成为研究热点,可作为肿瘤、免疫、血管病等多种疾病的生物学标志物及治疗靶点,目前尚无脑卒中患者循环外泌体microRNA表达的相关临床报道。有研究报道循环外泌体中高表达microRNA-223,且已有研究揭示microRNA-223参与缺血损伤修复的炎症反应、血管新生等病理过程,但脑缺血后循环exosomal microRNA-223表达水平如何变化尚不清楚。我们将首次探讨循环exosomal microRNA可否作为急性缺血性卒中的生物标志并分析其临床意义,进一步为利用外泌体为脑卒中的评估、疗效监测及靶向治疗提供理论依据。方法:收集急性缺血性卒中病人(发病72小时之内,n=50)和健康对照(n=33)外周血,采用SBI-Exoquick试剂提取血清外泌体并通过透射电镜鉴定及蛋白印记Western Blot鉴定其大小、形态及蛋白标志物。用 RT-PCR 检测血清 exosomal microRNA-21、exosomal microRNA-145、exosomal microRNA-223表达水平并分析其与NIHSS评分、脑梗死体积及卒中预后的关系。结果:从脑卒中患者血清中成功鉴定到外泌体存在:透射电镜下观察到大小30~100nm囊泡、Western Blot检测到标志蛋白CD9、CD63及Tsgl01表达。缺血性卒中患者循环exosomal microRNA-223表达明显上调(p<0.001),而循环 exosomal microRNA-21 及 microRNA-145 表达无明显变化(p>0.05)。microRNA-223 表达水平与 NIHSS 评分(r=0.307,p<0.05)呈明显的正相关。预后不良患者的microRNA-223表达水平高于预后良好患者的表达水平(p<0.05)。结论:循环exosomal microRNA-223有潜力成为预测缺血性卒中病人预后的生物学标记物。exosomal microRNA-223在缺血性卒中发生、发展及修复中的作用需要进一步研究。
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